[發明專利]來自海洋的節桿菌及其產低溫右旋糖苷酶的方法

有效

• 申請號: 201310272167.9
• 申請日: 2013-07-02
• 公開（公告）號: CN103343099A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 呂明生;王淑軍;蔡阮鴻;房耀維;焦豫良;劉姝
• 申請（專利權）人: 淮海工學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/44;C12R1/06
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 畢東峰

技術領域

本發明涉及一種微生物，特別是一種分離自中國江蘇省連云港海域的節桿菌YJ34（Arthrobacter?sp.?）CGMCC?N0.7385（已于2013年3月29日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏編號為CGMCC?N0.7385）；本發明還涉及該菌株產低溫右旋糖苷酶的方法。

背景技術

口腔中的細菌發酵食物中的蔗糖，生成右旋糖酐（α-D-glucan）。右旋糖酐由α-1,4、α-1,3以及α-1,6糖苷鍵構成，其中α-1,6糖苷鍵形成的側鏈決定其粘附性，右旋糖苷通過其粘附性相互交聯，形成保護性網狀結構，微生物特別是具有齲齒形成能力的鏈球菌在網狀結構保護下大量繁殖，在牙齒表面或縫隙中形成軟而粘稠的菌斑結構，這種結構稱牙菌斑，這些微生物分泌的酸性代謝物破壞牙釉質，從而導致齲齒。因此為了預防和控制齲齒和牙周病，抑制牙菌斑的發生和發展是至關重要的。

右旋糖苷（酐）酶(dextranase，EC3.2.1.11)，是專一切割右旋糖苷（Dextean）中α-1,6糖苷鍵的水解酶。右旋糖苷酶可以水解牙菌斑中的右旋糖苷，從而清除牙菌斑。早在1968年，fitzgerald首次報道了右旋糖苷酶在防齲方面的可能性，引起了人們的極大興趣。1969年Gibbons和keyes在飲水中加入右旋糖苷酶，成功地抑制了倉鼠齲齒的形成。1982年日本學者同田禎三也報告了用右旋糖苷酶抑制和分解人工菌斑的效果?(孫晉武,?1986)。1990年和1992年我國趙寶榮等對淡紫擬青霉?(Paecilomyces?lilacinus)?菌株8523右旋糖苷酶的防齲齒作用進行了研究，結果表明此酶具有顯普地抑制牙菌斑的作用(趙寶榮等,?1990；李玉晶等，1991)。2002年Marotta利用體外牙菌斑葡聚糖網狀基質合成過程模型，發現在牙菌斑形成過程中，右旋糖苷酶可減少葡聚糖形成量，而且形成的葡聚糖沒有粘附細菌細胞的能力（Marotta?et?al.，2002）。???????利用右旋糖苷酶抑制牙菌斑，近年來受到各國口腔醫學研究的重視，右旋糖苷酶是一種生物制劑，使用和保存簡便易行。無毒性，無耐藥性，不影響口腔內的生物生態平衡，對不會刷牙的嬰幼兒和不具備洗漱條件的情況下，是一種良好的預防牙齲齒斑的制劑。而每個人飯后，尤其是食糖后應用添加有此酶的漱口劑，是一項很好的抑制菌斑形成，預防齲齒和牙周病的有效措施。????????目前美國、加拿大等國家已將具有降解牙菌斑能力的右旋糖苷酶應用于以下商品的開發（受專利保護）：牙膏、口香糖、漱口液、軟膏、食品、啤酒、噴射液體牙齒清潔儀,而國內關于右旋糖苷酶的研究報道不多，僅見霉菌產右旋糖苷酶的報道，中國科學院微生物研究所報道的淡紫擬青霉、焦曲霉等霉菌（孫晉武等，1988，28(1)；程秀蘭等，1992）、合肥工業大學報道繩狀青霉菌和棘孢青霉(朱慧霞等，2010；張洪斌等，2011)和安徽大學報道黃綠青霉（岳曉婧等，2011），產酶時間長，多為6-8天。用霉菌來生產預防口腔牙菌斑的右旋糖苷酶存在安全性的問題，且產酶時間長，如果用在牙膏中，還存在堿性條件下不穩定的問題（孫晉武，1986）。海洋細菌右旋糖苷酶的開發將克服這些問題。??????海洋具有高鹽、低溫、堿性等極端環境，使得海洋微生物酶具有陸地微生物酶不具有的獨特催化性質和應用潛力。目前已從海洋微生物中篩選到產右旋糖苷酶的菌株主要為交替假單胞菌屬和弧菌屬（發明專利，ZL200910029584.4?，發明專利ZL?201010534675.6），這些菌產生的右旋糖苷酶作用溫度低，產酶時間短（12-30h），堿性條件下穩定，對牙菌斑生物膜有很好的抑制作用，將這種海洋細菌來源的右旋糖甘酶用于口腔護理劑（如漱口液、牙膏、口香糖）中，替代化學成分為主的口腔護理劑，將具有較好的經濟和社會效益。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種新的能產右旋糖苷酶的來自海洋的節桿菌YJ34。

本發明所要解決的另一個技術問題是提供上述節桿菌YJ34發酵生產右旋糖苷酶的方法。