[發(fā)明專利]一種油桐葉片再生植株的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310271826.7 | 申請(qǐng)日： | 2013-07-01 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103385168A | 公開(kāi)（公告）日： | 2013-11-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 譚曉風(fēng);李澤;張琳;袁軍;龍洪旭;曾艷玲;周俊琴 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中南林業(yè)科技大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | A01H4/00 | 分類號(hào)： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 長(zhǎng)沙市融智專利事務(wù)所 43114 | 代理人： | 袁靖 |
| 地址： | 410004 *** | 國(guó)省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 油桐 葉片 再生 植株 方法 | ||
1.一種油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，包括以下步驟：
將油桐無(wú)菌苗葉片，在無(wú)菌條件下切成面積為0.5-1cm2的葉盤，接種到1/2MS+1.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L?IAA+0.05-0.1mg/L?IBA的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定芽，暗培養(yǎng)3-5天后，在光照條件下培養(yǎng)20-30天，培養(yǎng)溫度為26士1℃，光照強(qiáng)度為1800-2000lx，光照時(shí)間14-16h/d；然后經(jīng)過(guò)繼代、增殖、壯苗和生根培養(yǎng)獲得完整植株；最后進(jìn)行煉苗、移栽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，繼代培養(yǎng)的具體過(guò)程如下：將葉盤誘導(dǎo)的不定芽切下接種到1/2MS+1.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L?IBA的培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的繼代培養(yǎng)，暗培養(yǎng)1-3天后，在光照條件下培養(yǎng)15-25天；培養(yǎng)溫度為26士1℃，光照強(qiáng)度為1800-2000lx，光照時(shí)間14-16h/d。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，增殖培養(yǎng)的具體過(guò)程如下：將繼代培養(yǎng)得到的不定芽切下接種到MS+2.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L?IBA的培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的增殖培養(yǎng)，暗培養(yǎng)1-3天后，在光照條件下培養(yǎng)25-30天；培養(yǎng)溫度為26士1℃，光照強(qiáng)度為1800-2000lx，光照時(shí)間14-16h/d。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，壯苗培養(yǎng)的具體過(guò)程如下：將增殖培養(yǎng)得到的芽轉(zhuǎn)接到MS+0.3-1.0mg/L6-BA+0.5-1.0mg/L?NAA的培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，暗培養(yǎng)1-3天后，在光照條件下培養(yǎng)20-25天；培養(yǎng)溫度為26士1℃，光照強(qiáng)度為1800-2000lx，光照時(shí)間14-16h/d。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，生根培養(yǎng)的具體過(guò)程如下：將增殖培養(yǎng)獲得2-4cm的苗接到1/2MS+0.05-0.3mg/LIBA的培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)；培養(yǎng)溫度為26士1℃；暗培養(yǎng)5-7天，再轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)5-8天生根，光照強(qiáng)度為1800-2000lx，光照時(shí)間14-16h/d。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，煉苗、移栽的具體過(guò)程如下：
將生根后的苗先在室內(nèi)進(jìn)行移栽前煉苗，3-5天后從培養(yǎng)瓶中取出，洗凈根部培養(yǎng)基，移栽到營(yíng)養(yǎng)杯中，基質(zhì)為泥炭土：珍珠巖：蛭石=2:1:1，組培苗移栽后保持濕度不低于80%，覆蓋薄膜并每天噴水1-2次，兩周后即可逐步進(jìn)行正常管理。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，葉盤誘導(dǎo)不定芽使用的培養(yǎng)基為：1/2MS+2.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L?IAA+0.05-0.1mg/L?IBA；
增殖培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為：MS+3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L?IBA；
壯苗培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為：MS+0.5mg/L6-BA+0.5-1.0mg/L?NAA；
生根培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為：1/2MS+0.05-0.1mg/L?IBA。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，所述的油桐無(wú)菌苗的獲得過(guò)程如下：
選取成熟的油桐當(dāng)年生種子，取其種皮，將種仁用自來(lái)水沖洗3-5min，然后浸泡20-30h，中間換水2-3次，然后在超凈工作臺(tái)中用0.1%的HgCl2消毒3-5min，用無(wú)菌水沖洗4-6次，接種在1/2MS基本培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)2-3天，再轉(zhuǎn)到光照條件下培養(yǎng)15-20天即可成苗，培養(yǎng)溫度為26士1℃，光照強(qiáng)度為1800-2000lx，光照時(shí)間14-16h/d。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油桐葉片再生植株的方法，其特征在于，所述的方法中用到的培養(yǎng)基均附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH調(diào)至5.4-5.8。
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