[發(fā)明專(zhuān)利]制備卵囊的改進(jìn)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310271169.6
• 申請(qǐng)日: 2002-08-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103316371A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J.E.哈欽斯;J.K.蒂切科斯基
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 恩布里克斯公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61L2/18
• 分類(lèi)號(hào): A61L2/18;A61L101/22;A61L101/36
• 代理公司: 中國(guó)專(zhuān)利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李波;權(quán)陸軍

本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2002年8月29日，申請(qǐng)?zhí)枮?00810149286.4，發(fā)明名稱(chēng)為“制備卵囊的改進(jìn)方法”的發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。

相關(guān)申請(qǐng)資料

本申請(qǐng)要求2001年8月30日提出的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?0/316310的權(quán)益，其全部?jī)?nèi)容通過(guò)引用結(jié)合到本說(shuō)明書(shū)中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明提供制備來(lái)源于原生動(dòng)物的卵囊的方法和組合物；特別地，本發(fā)明提供制備艾美蟲(chóng)(Eimeria)卵囊的方法和組合物。

背景技術(shù)

家禽球蟲(chóng)病是艾美蟲(chóng)屬原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)所致的疾病。艾美蟲(chóng)類(lèi)的卵囊普遍存在于環(huán)境并且在家禽垃圾中持續(xù)存活多個(gè)月。食入卵囊能以種特異性方式導(dǎo)致消化道多個(gè)部位的感染。這些生物體在消化道內(nèi)的增殖超過(guò)數(shù)日，結(jié)果使其下一代卵囊排泄于糞便中。重復(fù)周期感染導(dǎo)致免疫，并且當(dāng)家禽接受早期感染且家禽之間的劑量均一，經(jīng)過(guò)幾個(gè)周期接觸后可以形成相當(dāng)鞏固的免疫力。

相反，當(dāng)禽類(lèi)未以均一的方式接受感染，可能引起從未感染過(guò)的禽類(lèi)受到突然、嚴(yán)重感染的情形，導(dǎo)致飲食轉(zhuǎn)化能力以及體重增加的降低，以及較高的二次感染的危險(xiǎn)。目前，家禽工業(yè)中用于控制球蟲(chóng)病的最常見(jiàn)方法不是疫苗接種，而是在食物中給予抗球蟲(chóng)藥。接種率低常常是由于通過(guò)操作便利的飲食或飲水或通過(guò)孵化場(chǎng)噴灑接種的給藥均一性不可靠，這些是傳統(tǒng)的給藥途徑和時(shí)間。對(duì)改善孵化場(chǎng)給藥期間的給藥均一性的關(guān)注正在逐漸增加。

近來(lái)，已建立的卵內(nèi)接種技術(shù)適用于以活卵為基礎(chǔ)的球蟲(chóng)疫苗給藥(WO96/40234和WO96/40233；Pfizer，Inc.)。這種卵內(nèi)給藥途徑提供了一種對(duì)仍在禽卵中的各個(gè)胚胎給予均一劑量的疫苗的便捷方法。卵內(nèi)給予禽疫苗現(xiàn)在應(yīng)用于美國(guó)每年生產(chǎn)的90億只童子雞中的約85％，以及百分比漸增的在美國(guó)之外每年生產(chǎn)210億童子雞(例見(jiàn)，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4458630)。因此，活的、卵內(nèi)給藥的球蟲(chóng)疫苗的潛在市場(chǎng)顯著大于孵化后給予球蟲(chóng)疫苗的當(dāng)今市場(chǎng)。

采用于球蟲(chóng)活疫苗的卵囊來(lái)源于原先嚴(yán)重富含污染微生物的雞糞。通常，管理單位要求卵內(nèi)給藥疫苗應(yīng)當(dāng)表明基本不存在污染微生物。為最徹底地保證終產(chǎn)品中的生物負(fù)荷水平最小，在卵囊制備過(guò)程的各步驟中采用有效控制微生物污染水平的組合物和方法是有益的，包括收集和孢子形成步驟以及滅菌步驟。

目前疫苗制備中制備卵囊的方法的缺陷在于經(jīng)常使用對(duì)設(shè)備有害或腐蝕的材料。

因此，本領(lǐng)域內(nèi)需要一種改進(jìn)的由原生動(dòng)物制備卵囊的方法，尤其是用于制備疫苗。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明涉及改進(jìn)的制備原生動(dòng)物卵囊(例如，艾美蟲(chóng))的方法和組合物，例如用于制備疫苗。尤其在家禽疫苗方面，本發(fā)明適合于制備孵化后或卵內(nèi)使用的疫苗。同樣，該疫苗可以用于童子雞、蛋雞、種雞、火雞、小馬和/或家禽產(chǎn)業(yè)。

相應(yīng)地，第一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種用于制備卵囊的組合物，其包括過(guò)氧化合物和有機(jī)酸，所述組合物具酸性pH值。該組合物可以用于原生動(dòng)物卵囊的收集、孢子形成和/或滅菌。

由此，另一方面，本發(fā)明提供一種收集動(dòng)物糞便中的原生動(dòng)物卵囊的方法，其包括步驟：(a)提供原生動(dòng)物感染的動(dòng)物，其中動(dòng)物在其糞便中排泄源自原生動(dòng)物的卵囊，和(b)使來(lái)源于感染動(dòng)物的含卵囊的糞便與包括過(guò)氧化合物和有機(jī)酸的組合物接觸。

在特定的上述實(shí)施方案中，從組合物中撤除或者過(guò)氧化合物或者有機(jī)酸，特別是當(dāng)被用作收集介質(zhì)的時(shí)候。

另一方面，本發(fā)明提供一種使原生動(dòng)物卵囊形成孢子的方法，其包括步驟：(a)提供一種包括原生動(dòng)物卵囊的組合物，和(b)在適合孢子形成的條件下使卵囊在包括過(guò)氧化合物和有機(jī)酸的組合物中持續(xù)一定時(shí)間形成孢子。

再一方面，本發(fā)明提供一種使原生動(dòng)物卵囊消毒的方法，其包括：(a)提供一種包括原生動(dòng)物卵囊的制品，和(b)在足以達(dá)到對(duì)所述制品的需要消毒水平的條件下在包括過(guò)氧化合物和有機(jī)酸的組合物中使卵囊消毒一定時(shí)間。

又一方面，本發(fā)明提供一種用于純化原生動(dòng)物卵囊的浮選介質(zhì)，其包括高密度、非離子溶液和聚陽(yáng)離子。在另一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種用于純化原生動(dòng)物卵囊的浮選介質(zhì)，其包括高密度、非離子溶液和油。

本發(fā)明也提供一種通過(guò)浮選而純化原生動(dòng)物卵囊的方法，其步驟包括：(a)在上述浮選介質(zhì)和大量原生動(dòng)物卵囊之間形成懸浮液，(b)讓?xiě)腋∫悍謱樱?c)從分層的懸浮液中收獲原生動(dòng)物卵囊。

本發(fā)明上述方面的一種特定實(shí)施方案中，原生動(dòng)物包括艾美蟲(chóng)屬的物種并且動(dòng)物對(duì)象為禽類(lèi)。