[發明專利]京尼平苷轉化為京尼平的方法

有效

• 申請號: 201310270592.4
• 申請日: 2013-06-28
• 公開（公告）號: CN103305555A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 周光偉
• 申請（專利權）人: 西安紐賽生物科技有限公司
• 主分類號: C12P7/06
• 分類號: C12P7/06
• 代理公司: 西安智邦專利商標代理有限公司 61211
• 代理人: 姚敏杰

技術領域

本發明屬于化學提純技術領域，涉及一種京尼平的加工制備方法，尤其涉及一種京尼平苷轉化為京尼平的方法。

背景技術

梔子是茜草科（Rubiaceae）植物梔子（Gardenia?jasminoides?Ellis）的果實，長橢圓形或橢圓形，呈深紅色或黃紅色，梔子屬衛生部頒布的首批藥食兩用資源，是傳統中藥。梔子具有瀉火除煩，清熱利濕，涼血解毒，利膽保肝，降壓，滅菌消炎，外用消腫止痛的功效。中醫臨床上主要用于治療熱病，黃疸型肝炎，扭挫傷，高血壓，糖尿病等。梔子中的化學成分很多，其中主要有藏花素，藏花酸（Ichietal）和京尼平苷（Geniposide）等環烯醚萜類化合物，其中京尼平苷是其主要有效成分。京尼平苷（Geniposide）屬于環烯醚萜類化合物，是梔子的活性成分之一，而京尼平（Genipin）由京尼平苷分解后分離提純而獲得，其主要用途有：京尼平可與氨基酸或者蛋白質反應，生成一種梔子藍色素，這種天然色素因其無毒性而被用于食品染料的制作；優良的天然生物交聯劑：可以與蛋白質、膠原、明膠和殼聚糖等交聯制作生物材料，如人造骨骼、傷口包扎材料等，其毒性遠低于戊二醛和其他常用化學交聯劑；可用于治療肝臟疾病、降壓、通便等。以色列一家醫療中心的研究結果表明，京尼平可以緩解II型糖尿病的癥狀；制備固定化酶的交聯劑；是迄今發現的環烯醚萜苷中抑制誘變劑誘變活性最強的物質；也有文獻報道京尼平具有抗血栓抑制細胞凋亡的作用；總的來說，京尼平應用廣泛，具有開發潛力，廣闊的市場前景和巨大的利用價值。

目前，沒有關于從梔子中直接提取京尼平的報道，只有從梔子干果或提取梔子黃色素的廢液中提取京尼平苷的資料和文獻，而京尼平的生產主要是用酶解的方法，一般采取β葡萄糖苷酶或者復合纖維素酶，但由于操作的過程和反應條件的不同，從而使反應過程不好控制，副產物多，產品收率低的問題，從而導致產品的成本較高。

發明內容

為了解決背景技術中存在的上述技術問題，本發明提供了一種反應過程可控、副產物少以及產品收率高的京尼平苷轉化為京尼平的方法。

本發明的技術解決方案是：本發明提供了一種京尼平苷轉化為京尼平的方法，其特殊之處在于：所述方法包括以下步驟：

1）制備吸附有京尼平苷的樹脂；

2）制備酶分散液；

3）將步驟1）中所制備的樹脂加入步驟2）中的酶分散液中形成反應液進行酶解反應；所述酶解反應的條件是在40-50℃條件下水浴加熱；

4）將步驟3）所形成的反應液放置室溫后，加入乙酸乙酯進行萃取，并回收乙酸乙酯液；

5）將步驟4）中得到的乙酸乙酯液濃縮析出京尼平。

上述京尼平苷轉化為京尼平的方法在步驟5）之后還包括：

6）將步驟5）得到的京尼平加入乙酸乙酯中進行第二次結晶，回收乙酸乙酯液，濃縮析出京尼平晶體。

上述步驟1）的具體實現方式是：

1.1）將京尼平苷加入至京尼平苷重量3-5倍的醋酸鹽緩沖液中并攪拌分散；

1.2）在步驟1.1）中所形成的溶液中加入京尼平苷重量1-2倍的樹脂，攪拌并過夜，形成吸附有京尼平苷的樹脂；

1.3）采用去離子水對步驟1.2）所形成的吸附有京尼平苷的樹脂進行清洗。

上述步驟1.1）中醋酸鹽緩沖液的pH是4～5。

上述步驟1.2）中的樹脂是大孔樹脂。

上述樹脂是D101型、LSD-632型、LSA-700型、XDA-7型或XDA-6型。

上述步驟2）的具體實現方式是：

將復合纖維素酶或者β葡萄糖苷酶加入至京尼平苷重量3-5倍的醋酸鹽緩沖液中并對其進行充分攪拌；所述醋酸鹽緩沖液的pH是4～5。

上述復合纖維素酶或者β葡萄糖苷酶的用量不低于京尼平苷重量的1/20。

上述步驟4）中進行萃取時的乙酸乙酯用量是步驟3）中所形成的反應液的2-3倍。

本發明的優點是：

本發明提供了一種京尼平苷轉化為京尼平的方法，該方法是將提取好的京尼平苷粉末，先吸附，酶解后再吸附，然后洗脫，最后將洗脫液濃縮，得到京尼平粗結晶，再重結晶后得到京尼平結晶。采用本發明公開的制備方法，分離得到的京尼平收率高，收率穩定，過程易于控制，產品純度高。

具體實施方式