[發明專利]表達鐵納米顆粒以及溫度敏感通道的病毒LVSTF及用途

無效

• 申請號: 201310267583.X
• 申請日: 2013-07-01
• 公開（公告）號: CN103320395A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 李曉明;李玥;耿紅巖
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/867;A61K41/00;A61P25/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 周烽

1.一種表達鐵納米顆粒以及溫度敏感通道的病毒LVSTF，其特征在于，該病毒LVSTF通過以下方法制備得到：首先進行目的片段構建設計：TRPV1構建在CAG啟動子下游，小鼠鐵蛋白重鏈與小鼠鐵蛋白輕鏈之間用一個可變鏈接區進行克隆，形成鐵蛋白輕鏈-連接體-重鏈融合蛋白；鐵蛋白輕鏈-連接體-重鏈融合蛋白構建位于TRPV1基因下游，在鐵融合蛋白兩側各有一個2A自身裂解片段，從而實現TRPV1和鐵融合蛋白的非融合共表達；EGFP報告基因克隆于鐵融合蛋白下游；然后進行病毒LVSTF的包裝：慢病毒經過表達，包裝和包埋帶有目的片段的質粒后，轉染到HEK293T細胞系中，使其充分表達并形成病毒顆粒；48小時后將培養基收集，用多步離心法進行病毒顆粒的純化和濃縮，最后將病毒溶解在滅菌的PBS中，分裝并儲存于-80℃備用，從而得到慢病毒LVSTF；該病毒LVSTF具有SEQ?ID?NO.1所示的基因序列。

2.一種上述表達鐵納米顆粒以及溫度敏感通道的病毒LVSTF在激活神經元方面的用途。