[發明專利]一種四環素濾液中草酸的測定方法有效

申請號：	201310266014.3	申請日：	2013-06-28
公開（公告）號：	CN103336073A	公開（公告）日：	2013-10-02
發明（設計）人：	鄒學鋒;孫瑞君	申請（專利權）人：	寧夏啟元藥業有限公司
主分類號：	G01N30/02	分類號：	G01N30/02
代理公司：	寧夏專利服務中心 64100	代理人：	徐淑芬
地址：	750101 寧夏回族自***	國省代碼：	寧夏;64
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種四環素濾液草酸測定方法
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【說明書】：

技術領域

????本發明涉及一種醫藥檢測技術領域，特別是涉及一種四環素濾液中草酸的測定方法。

背景技術

微生物發酵技術生產抗生素是目前抗生素生產的主要技術，該方法的特點是產量大、成本低、易于規模化生產。四環素由金色鏈絲菌經微生物發酵、酸化、結晶、精制而成。在發酵過程中，四環素存在于微生物細胞內，需要經酸化處理，將四環素從細胞中釋放出來。在可被用于四環素酸化的酸性物質中，草酸以其酸性適中、成本低，酸化釋放率高的特點被廣泛利用。

四環素酸化過程中，草酸加量為發酵液體積的3.6%，四環素結晶過濾后，草酸存在廢液中。如此大量的草酸如果隨同廢液處理，有如下不足：①增加環保處理難度；②抬高生產成本；③三是資源浪費。所以回收草酸是節省成本、保護環境的必要步驟。在回收過程中，檢測回收前后廢液中草酸含量，對回收工作是至關重要的。

目前在國家標準（GB/T?9730-2007）中對草酸及草酸根的測定，采用比色法或分光法。這些方法的缺點是操作復雜、試劑配制繁瑣、背景值對結果影響大、準確性稍差。

陰彩霞在《一種檢測水溶液中草酸根的方法》(專利號：CN200810054882.4)一文中，檢測了水溶液中草酸根的含量，采用了紫外可見分光光度法，收到了良好的效果。該法測定澄清水溶液中草酸含量尚可，對于四環素酸化廢液這樣具有顏色的溶液，用該法測定，干擾較多、準確性差。

李海龍在《一種測定食品或蔬菜中草酸含量的方法》(專利號：CN201210502744.4)一文中，檢測了食品或蔬菜中草酸的含量，采用了頂空氣相色譜法，收到了良好的效果。但該法頂空操作耗時較長，不能快速檢測四環素酸化廢液中草酸的含量。

發明內容

本發明的目的就在于克服上述現有技術的缺陷，旨在建立一種操作簡便，分析快速，檢測結果準確的四環素濾液中草酸的測定方法，該方法對四環素生產過程中草酸濃度進行監測，同時對四環素濾液中草酸的回收提供依據。

為實現上述發明目的所采取的技術方案為：

一種四環素濾液中草酸的測定方法，其特征在于采用高效液相色譜法。

上述高效液相色譜法的色譜條件為：

色譜柱：C18柱；

流動相：0.1%～0.2%四丁基硫酸氫銨，用氨水調節pH至7.3～7.7；

流動相流速為：0.7ml/min～1.2ml/min；

檢測波長：205nm～220nm。

本發明采用高效液相色譜法對四環素酸化廢液中草酸含量進行了檢測，與紫外可見分光光度法、頂空氣相色譜法檢測溶液中草酸含量相比，具有如下特點：①采用高效液相色譜法，檢測結果準確、可靠；②分析快速，整個測定約需20min；③干擾因素少，草酸和其他物質能有效分離；④流動相采用四丁基硫酸氫銨溶液，配制簡單、成本低廉；⑤操作簡單，溶液制備只需用水稀釋；⑥提高草酸回收設備使用效率及回收操作人員工作效率。

附圖說明

圖1為實施例1的色譜圖；

圖2為實施例2的色譜圖；

圖3為實施例3的色譜圖；

圖4為實施例4的色譜圖。

具體實施方式

1?色譜條件：

色譜柱：C18柱，Agilent?XDB?C18，150mm×4.6mm；

流動相：0.1%～0.2%四丁基硫酸氫銨（用氨水調節pH至7.3～7.7）；流動相流速為：0.7ml/min～1.2ml/min；

檢測波長：205nm～220nm。

2?溶液制備：樣品溶液配制：取四環素濾液用水稀釋至草酸濃度為0.1mg/ml～2mg/ml。

3?測定：將溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖并進行分析。