[發明專利]一種非凍型RNA保護液有效
| 申請號: | 201310260413.9 | 申請日: | 2013-06-25 |
| 公開(公告)號: | CN103820320B | 公開(公告)日: | 2017-03-15 |
| 發明(設計)人: | 周細武;邱英華;牛歡歡 | 申請(專利權)人: | 寧波有成生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/04 | 分類號: | C12N1/04;C12N15/11;A01N1/02;C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 315040 浙江省寧波市*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 非凍型 rna 保護 | ||
1.用于檢測PIK3CA基因突變的特異性引物和探針,包括下列標簽序列和10組30條引物和探針。?
(1)標簽序列:taactactgtcgacactgacag?
(2)PIK3CA基因突變的特異性引物和探針核苷酸序列,見本發明說明書表2,P-SEQ-1~P-SEQ-30。?
2.一種檢測PIK3CA基因突變的檢測試劑盒,其特征在于,包括權利要求1所述的10組30條引物和探針。?
3.如權利要求2所述的檢測PIK3CA基因突變的檢測試劑盒,包括以下熒光定量PCR反應體系:?
4.如權利要求2所述的檢測PIK3CA基因突變的檢測試劑盒,熒光定量PCR反應條件為:?
95℃預變性5分鐘后進入以下循環:72℃15秒,95℃15秒,64℃45秒,進行15個循環;72℃15秒,95℃15秒,60℃45秒,共45個循環,熒光信號收集溫度設定在退火溫度。?
5.如權利要求2所述的檢測PIK3CA基因突變的檢測試劑盒,檢測結果判定方法為:以HEX的信號達到設定閾值(Ct>18)時表明樣品DNA中包含PIK3CA基因,且上樣量在允許范圍內,說明FAM的信號可信、有效;以FAM信號達到設定閾值時所需的循環次數Ct值作為陰陽性判斷的標準,當Ct值等于0或35時,檢測結果判定為陰性,Ct值<32時,檢測結果為陽性。?
6.如權利要求2所述的檢測PIK3CA基因突變的檢測試劑盒,待檢測樣品包括新鮮病理組織、石蠟包埋病理組織、石蠟切片和血液。?
7.一種用于檢測PIK3CA基因突變的引物和探針,其特征在于,由P-SEQ-1~P-SEQ-30的寡核苷酸引物和探針或序列與其有至少70%同一性的寡核苷酸組成。?
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