[發明專利]一種基于棒狀病毒的水凝膠的制備方法和應用

無效

• 申請號: 201310256631.5
• 申請日: 2013-06-20
• 公開（公告）號: CN103319732A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 張珍坤;熊潔;高紅軍;李昂;史林啟
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: C08J3/075
• 分類號: C08J3/075;C08L33/24;A61K47/46;A61K38/28
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司 12002
• 代理人: 侯力

1.一種基于棒狀病毒的水凝膠的制備方法，所述病毒水凝膠由高分子修飾過的棒狀復合病毒粒子構成，所述高分子為平均分子量7?kDa的具有溫敏性的聚合物，修飾的聚合物密度為0.1聚合物每平方納米，所述棒狀病毒為fd噬菌體，其特征在于：所述基于棒狀病毒的水凝膠制備方法包括如下步驟：

1）采用鏈轉移自由基聚合的方法合成溫敏性聚合物，15-20?℃下將溫敏性聚合物溶解于二甲基亞砜有機溶劑中，得到聚合物溶液；

2）以大腸桿菌為宿主制備fd噬菌體，15-20?℃下將fd噬菌體溶解于110?mM、pH=8.0的磷酸緩沖溶液中，得到fd噬菌體濃度為2?mg/mL的病毒溶液；

3）4?℃下將聚合物溶液緩慢滴加入快速攪拌的上述病毒溶液中，15-20?℃下反應8-12小時，在50,000轉/分下超速離心除去過量的聚合物，制得溫敏性高分子修飾的復合病毒粒子；

4）15-20?℃下將修飾有聚合物的病毒粒子溶解于110?mM、pH為8.0的磷酸緩沖溶液中制備成溶液，病毒粒子在溶液中的濃度為不小于2.7?mg/mL，將溶液升溫至高于凝膠化轉變溫度，即可制得基于棒狀病毒的水凝膠。

2.根據權利要求1所述基于棒狀病毒的水凝膠的制備方法，其特征在于：所述溫敏性聚合物為聚異丙基丙烯酰胺（PNIPAM）或聚異丙基丙烯酰胺-co-聚叔丁基丙烯酰胺（PNIPAM-co-PNTBA）共聚物，溫敏性聚合物與病毒的質量比為10:1，二甲基亞砜的體積小于緩沖溶液體積的5%。

3.一種如權利要求1所制備的基于棒狀病毒的水凝膠的應用，其特征在于：將其制備成骨架表面再修飾有功能基團的復合病毒水凝膠，可作為胰島素緩釋智能材料，即作為化學反應熱點去綁定具有特定功能的基團苯硼酸，且成膠后骨架表面活性基團仍然可達，骨架表面再修飾有功能基團的復合病毒水凝膠的制備方法包括如下步驟：

1）15-20?℃下將基于棒狀病毒的水凝膠溶解于110?mM、pH為8.0的磷酸緩沖溶液中制得復合病毒溶液，復合病毒溶液中病毒水凝膠的濃度為2?mg/mL；

2）將功能小分子苯硼酸衍生物活化，方法是用二環己基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺活化帶有端羧基的苯硼酸衍生物的羧基，苯硼酸衍生物、二環己基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺的質量比為10:11:6，反應結束后濾去不溶物，濾液用大于10倍體積的乙醚沉淀純化，分離的沉淀物即為活化的功能小分子苯硼酸衍生物；

3）15-20?℃下將上述活化的功能小分子苯硼酸衍生物溶解于二甲基亞砜中，得到功能小分子溶液；

4）4?℃下將功能小分子溶液緩慢滴入轉數為5轉/秒電磁攪拌的復合病毒溶液中，10?℃下反應8-10小時，在50,000轉/分下超速離心除去過量的功能小分子，即可制得骨架表面再修飾有功能基團的復合病毒粒子；

5）15-20?℃下將骨架表面再修飾有功能化小分子的復合病毒粒子溶解于110?mM、pH為8.0的磷酸緩沖溶液中制備成溶液，病毒粒子在溶液中的濃度為不小于3?mg/mL，升溫至高于凝膠化轉變溫度，即可制得骨架表面再修飾有功能基團的病毒水凝膠。

4.根據權利要求3所制備的基于棒狀病毒的水凝膠的應用，其特征在于：所述功能小分子與修飾上聚合物的病毒粒子的質量比為6:5，二甲基亞砜的體積小于緩沖溶液體積的5%。