[發(fā)明專利]蛋白質(zhì)的聚乙二醇化修飾方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310255841.2 | 申請日: | 2013-06-24 |
| 公開(公告)號: | CN103421079A | 公開(公告)日: | 2013-12-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 黃志鋒;牛建樓;李校堃;劉白玲;宋林濤;謝遙遙;朱雁林;施璐 | 申請(專利權(quán))人: | 溫州醫(yī)學(xué)院;黃志鋒 |
| 主分類號: | C07K1/113 | 分類號: | C07K1/113;C07K1/04 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飛 |
| 地址: | 325035 浙江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 蛋白質(zhì) 聚乙二醇 修飾 方法 | ||
1.蛋白質(zhì)的聚乙二醇化修飾方法,其特征在于,其是以疏水層析色譜柱為固相反應(yīng)載體的蛋白質(zhì)的聚乙二醇化修飾方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,對于疏水性強(qiáng)的蛋白,在高鹽狀態(tài)下將蛋白吸附于疏水層析色譜柱上,以聚乙二醇修飾劑為流動相,反應(yīng)完成后采用鹽離子梯度洗脫獲得聚乙二醇修飾的蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,對于疏水性弱的蛋白,在高鹽狀態(tài)下將聚乙二醇修飾劑吸附于疏水層析色譜柱上,以蛋白溶液為流動相,反應(yīng)完成后采用鹽離子梯度洗脫獲得聚乙二醇修飾的蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,所述疏水層析色譜柱的填充物質(zhì)包括HiTrap?Butyl?FF、HiTrap?Octyl?FF或HiTrap?Phenyl?FF。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述聚乙二醇修飾劑包括聚乙二醇-丁醛、聚乙二醇-丙醛或聚乙二醇琥珀酸酯。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述聚乙二醇修飾劑的分子量大小為5kDa-40kDa。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述聚乙二醇修飾劑的分子量大小為20kDa。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,所述疏水性強(qiáng)的蛋白包括溶菌酶或α-糜蛋白酶。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述疏水性弱的蛋白包括重組酸性成纖維細(xì)胞生長因子或重組堿性成纖維細(xì)胞生長因子。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,所述高鹽狀態(tài)是指將蛋白或聚乙二醇修飾劑溶解于含有2-3M氯化鈉的磷酸鹽緩沖液中。
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