[發(fā)明專利]一種從座殼孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310255163.X
• 申請日: 2013-06-25
• 公開（公告）號: CN103305582A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設計）人: 邱君志;毛麗慧;郭慶豐;曹麗萍;張以盼;何肖云;孟麗雪;李小霞;涂潔;姚靈丹
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12P33/00
• 分類號: C12P33/00;C07J63/00;C12R1/645
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.本發(fā)明公開一種從座殼孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法，其特征包括以下步驟：

1）初級、次級培養(yǎng)：座殼孢菌活化后，取菌塊接種到搖瓶培養(yǎng)基中，在120~200?r/min、20~28℃條件下連續(xù)培養(yǎng)5~10天即初級培養(yǎng)，按8％~10％接種量再次轉接到搖瓶培養(yǎng)基中，在20~28℃條件下靜止培養(yǎng)35~40天即次級代謝產物。

2）冷浸提取：菌液和菌絲體過濾分離，菌絲體在3℃～10℃的有機溶劑中浸泡48～72小時，過濾得浸泡液，旋蒸溫度控制在35℃～40℃得浸膏，回收有機溶劑。

3）搖瓶萃取：加水溶解浸膏，水與浸膏重量比為50:1～100:1，將水溶物倒入分液漏斗中，加入1～2倍的乙酸乙酯搖瓶萃取，搖30分鐘，靜止30分鐘，再搖30分鐘，靜止30分鐘，待分成后取乙酸乙酯部分，旋轉濃縮得粗提物。

4）分離純化：粗提物上160～200目硅膠柱，以正己烷：乙酸乙酯梯度洗脫，收集正己烷：乙酸乙酯體積比=10:1部分洗脫液，旋蒸濃縮得粗提物A，將粗提物A上200～300目硅膠柱，以石油醚：丙酮梯度洗脫，收集石油醚：丙酮體積比=15：1部分洗脫液，得白色含晶體的物質，再將白色含晶體的物質用氯仿溶解，放在4℃冰箱里自然揮干，最后經甲醇重結晶得17(21)-藿烯-12β-醇。

2.根據權利要求1所述的一種從座殼孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法，其特征在于：所述步驟1）中的搖瓶培養(yǎng)基為沙氏培養(yǎng)基。

3.根據權利要求1所述的一種從座殼孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法，其特征在于：所述步驟2）中的有機溶劑為丙酮、乙醇、甲醇中的任一種。