[發(fā)明專利]具有腎素和ACE雙重抑制活性的小肽及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310252712.8
• 申請日: 2013-06-24
• 公開（公告）號: CN103288918A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鞠興榮;何榮;袁建;王立峰;汪海峰;都立輝;高瑀瓏;唐培安;周建新;陳銀基;鄭毅;石嘉懌
• 申請（專利權(quán)）人: 南京財經(jīng)大學(xué)
• 主分類號: C07K5/062
• 分類號: C07K5/062;C07K1/16;C12P21/06;A61K38/05;A61P9/12;A23L1/29
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務(wù)所(普通合伙) 32238
• 代理人: 張立榮

1.一種具有腎素和ACE雙重抑制活性的小肽，氨基酸序列為Leu-Tyr。

2.一種權(quán)利要求1所述小肽的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將菜籽粕粉碎，分散于蒸餾水中，用堿液調(diào)節(jié)pH?為10.5-11.5，并維持pH不變，攪拌1-2?h，離心后分離上清液和沉淀，所述上清液為菜籽蛋白粗提液，所述沉淀為殘渣；調(diào)節(jié)所述菜籽蛋白粗提液的pH為4-5，靜置后離心取沉淀，即得菜籽蛋白粗提物；

（2）將所述菜籽蛋白粗提物用蛋白酶?Alcalase水解，得到菜籽蛋白水解物；

（3）將所述菜籽蛋白水解物采用高效液相色譜分離，得到所述小肽。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述小肽的制備方法，其特征在于：將步驟（1）中所述殘渣分散于蒸餾水中，用堿液調(diào)節(jié)pH?為10.5-11.5，并維持pH不變，攪拌，離心后取上清液，所述上清液為菜籽蛋白粗提液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述小肽的制備方法，其特征在于：步驟（2）所述水解的具體方法為：將菜籽蛋白粗提物冷凍干燥后溶于水，調(diào)節(jié)pH為7.5-8.5，加入蛋白酶Alcalase，在45-55℃條件下進行水解反應(yīng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述小肽的制備方法，其特征在于：步驟（3）的具體方法為：將所述菜籽蛋白水解物依次采用Jupiter?C12?色譜柱和Vydac?C18色譜柱進行分離，得到所述小肽。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述小肽的制備方法，其特征在于：將所述菜籽蛋白水解物采用Jupiter?C12?色譜柱分離的具體方法為：

將菜籽蛋白水解物上樣于Jupiter?C12?色譜柱，用流動相A和B進行洗脫，洗脫程序：0～35?min，流動相B?5～80%線性升高，流動相A?95～20%線性降低，收集對應(yīng)于流動相B體積濃度為60-70%時的洗脫液F5；

將洗脫液F5再次采用Jupiter?C12?色譜柱分離，用流動相A和B進行洗脫，洗脫程序為：?0～40?min，流動相A?35～30%線性降低，流動相B?65～70%線性升高，收集對應(yīng)于流動相B體積濃度為67-68%時的洗脫液F5-F；

所述流動相A：質(zhì)量百分濃度為0.05-0.2%三氟乙酸的水溶液；所述流動相B：質(zhì)量百分濃度為0.05-0.2%三氟乙酸的甲醇溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述小肽的制備方法，其特征在于：將所述洗脫液F5-F采用Vydac?C18色譜柱進行分離的具體方法為：采用流動相A和B進行洗脫，收集對應(yīng)于流動相B體積濃度為16.5-18.0%時的洗脫液，即得所述小肽；所述流動相A：質(zhì)量百分濃度為0.05-0.2%三氟乙酸的水溶液；所述流動相B：質(zhì)量百分濃度為0.05-0.2%三氟乙酸的甲醇溶液；所述洗脫程序：0～60?min，流動相A?95～70%線性降低，流動相B?5-30%線性升高。

8.一種權(quán)利要求1所述具有腎素和ACE抑制活性的小肽在制備降血壓藥物或具有降血壓功能的食品中的應(yīng)用。

9.一種降血壓藥物組合物，其特征在于含有氨基酸序列為Leu-Tyr的小肽。

10.一種具有降血壓功能的食品，其特征在于含有氨基酸序列為Leu-Tyr的小肽。