[發明專利]一種從紫杉醇浸膏分離純化紫杉醇的方法

有效

• 申請號: 201310251956.4
• 申請日: 2013-06-21
• 公開（公告）號: CN103275039A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 任莉;丁正飛;胡立
• 申請（專利權）人: 江蘇紅豆杉藥業有限公司
• 主分類號: C07D305/14
• 分類號: C07D305/14
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

技術領域

本發明涉及分離純化紫杉醇的技術領域，具體涉及一種從紫杉醇浸膏分離純化紫杉醇的方法。

背景技術

紫杉醇（Taxol）的分子結構式如下：

紫杉醇是近二十年來世界上發現的最有希望的抗癌藥物，于1967年首次從短葉紅豆杉樹皮中分離獲得，已被美國FDA批準用于卵巢癌、乳腺癌以及非小細胞肺癌等的治療。

紫杉醇屬于二萜類生物堿，在紅豆杉屬植物中含量都很低，只有0.0004%和0.01%（w/w）之間。天然紅豆杉資源極為有限，且紅豆杉生長緩慢，無法滿足紫杉醇生產的需要量。如此低的含量使從原料中提取和純化該化合物以達到純品要求是非常困難的，分離純化過程中紫杉醇收率的高低，決定了企業效益的巨大差異。因此，如何改進紫杉醇的分離純化工藝，是所有生產企業普遍重視的課題。

目前報道中使用的分離方法有很多，主要有硅膠柱層析法、氧化鋁柱層析法、大孔樹脂柱法、C18柱層析法等。

CN102417492A中，將紫杉醇粗品用氯仿溶解后加入硅膠制得干樣，再進行柱層析，用三元流動相進行洗脫，洗脫液經濃縮、結晶和干燥得到紫杉醇半成品，再經二次柱層析分離制得純品。此類方法操作過程中較簡便，但使用三元流動相，在大規模生產中溶劑無法重復利用，成本較大。

CN102838568A中，將經甲醇提取、氯仿萃取后的起始物料經氯仿-甲醇、正己烷-乙酸乙酯兩次硅膠柱層析后得到紫杉醇粗品，再進行第三次正相柱層析，用經化學處理的硅膠作為固定相，分離出來得最深處重結晶一次后得到98%以上的純品。此方法在第三次柱層析時所用硅膠需進行化學處理，在大規模生產中應用性不強，且整個紫杉醇收率不高，有一定的局限性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從紫杉醇浸膏分離純化紫杉醇的方法，所述方法所用溶劑品種相對較少，操作靈活簡便，降低了成本，紫杉醇回收率較高，能夠很好地應用到大規模生產中。

為了達到上述目的，本發明采用了如下技術方案：

一種從紫杉醇浸膏分離純化紫杉醇的方法，所述方法包括如下步驟：

（1）在層析柱內加入空白硅膠完成裝柱，然后將紫杉醇浸膏用有機溶劑溶解后加入硅膠拌勻制得干樣，再將干樣裝入層析柱中，用流動相加低壓進行洗脫，收集有效段；

（2）將步驟（1）所得的有效段進行濃縮干燥，用乙酸乙酯和正己烷進行結晶；

（3）在層析柱內加入空白硅膠完成裝柱，然后將步驟（2）所得的晶體用有機溶劑溶解后加入硅膠拌勻制得干樣，再將干樣裝入層析柱中，用流動相加低壓進行洗脫，收集有效段；

（4）將步驟（3）所得的有效段進行濃縮干燥，將得到的干燥物用甲醇溶解后過氧化鋁柱，然后用純化水進行結晶，晶體再用甲醇和和純化水重結晶一次，將重結晶得到的晶體干燥；

（5）將步驟（4）所得的干燥物用有機溶劑溶解，將得到的樣液加入已用空白硅膠完成裝柱的層析柱后，用流動相加高壓進行洗脫，收集有效段；

（6）將步驟（5）所得的有效段進行濃縮干燥，用乙酸乙酯和正己烷進行結晶，得到純度為98.5wt%以上的紫杉醇。

本發明所述空白硅膠即沒有拌樣品的硅膠。

其中，步驟（4）所述重結晶即晶體用甲醇溶解后，加入純化水結晶。

步驟（1）所述紫杉醇浸膏從紅豆杉樹根中提取得到，該紫杉醇浸膏中紫杉醇的含量為1～3wt%，例如1.2wt%、1.4wt%、1.6wt%、1.8wt%、2wt%、2.2wt%、2.4wt%、2.6wt%、2.8wt%、2.9wt%。

步驟（1）所述有機溶劑選自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮或乙酸乙酯中的任意一種或者至少兩種的混合物。所述混合物例如乙酸乙酯和丙酮的混合物，丙酮和三氯甲烷的混合物，三氯甲烷和二氯甲烷的混合物，乙酸乙酯和三氯甲烷的混合物，丙酮和二氯甲烷的混合物，乙酸乙酯、丙酮和三氯甲烷的混合物，丙酮、三氯甲烷和二氯甲烷的混合物。

步驟（1）所述硅膠的目數為100～200目、200～300目、300～400目或500～800目，優選100～200目或200～300目，進一步優選100～200目，例如110目、120目、130目、140目、150目、160目、170目、180目、190目。