[發明專利]一種四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝

無效

• 申請號: 201310250075.0
• 申請日: 2013-06-21
• 公開（公告）號: CN103404427A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 蔡衍山
• 申請（專利權）人: 連云港馬詩龍生物科技有限公司;福建馬詩龍生物科技有限公司
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H15/00
• 代理公司: 南京理工大學專利中心 32203
• 代理人: 朱顯國

1.一種四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一，親本選擇；

步驟二，親本單孢分離；

步驟三，親本單孢分類與篩選：根據單孢菌絲萌發后在馬鈴薯葡萄糖瓊脂PDA培養基上的菌絲生長粗細、疏密，貼生與氣生，有無氣生菌絲，菌絲生長速度，把單孢菌絲分為A型正常型、B型絨毛氣生型、C型粉狀緊密貼生型和介于它們之間的A-B、B-C、C-B六種類型；

步驟四，親本單孢驗證；

步驟五，親本單孢直接組合交配；

步驟六，雜交異核體驗證；

步驟七，雜交異核體實驗室篩選；

步驟八，異核體菌株出菇試驗與篩選；

步驟九，異核體菌株的穩定性考察；

步驟十，異核體菌株分離；

步驟十一，雜交菌株鑒定。

2.根據權利要求1所述的四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，親本選擇是根據產品符合市場需求確定育種目標，選擇具有性狀互補的親本。

3.根據權利要求1所述的四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，步驟三中，?A型正常型，菌絲在PDA培養基表面生長，絲狀清晰，正常，均勻稀疏，生長速度為0.5cm/24h以上；B型為絨毛氣生型，菌絲在PDA培養基表面生長，呈絨毛狀，培養基表面有氣生菌絲，0.1cm/24h﹤生長速度﹤0.5cm/24h；C型為粉狀致密貼生型，菌絲在PDA培養基表面生長呈粉狀，緊貼培養基表面，無氣生菌絲，生長速度為0.1cm/24h以下；A-B型為菌絲生長狀態介于A型與B型之間；B-C型為菌絲生長狀態介于B型與C型之間；C-B型為菌絲生長狀態介于C型與B型之間。

4.根據權利要求1所述的四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，親本單孢驗證方法為，鏡檢觀察單孢菌絲有否鎖狀聯合，并把單孢菌絲接入木屑培養基中培養，驗證菌絲能否扭結、出菇。

5.根據權利要求1所述的四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，親本單孢直接組合交配方法為，根據步驟四親本單孢驗證后的單孢菌絲六種類型，分別采用以A類型與A-B、B-C、C-B，B類型與A-B、B-C、C-B，C類型與A-B、B-C、C-B及AxB，AxC，BxC進行直接交配。

6.根據權利要求1所述的四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，雜交異核體驗證方法為，鏡檢觀察異核體菌株有否鎖狀聯合，并把異核體菌絲接入木屑培養基中培養。

7.根據權利要求1所述的四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，步驟七中雜交異核體實驗室篩選方法為：首先，將A、B、C三種類型菌絲各分為3組以上，每組中發現任意一類型菌絲與其它類型單孢菌絲交配后的異核體菌絲有出現假鎖狀聯合和不鎖狀聯合現象，且該現象出現率達到60%以上，即可把該組所有牽連的異核菌株淘汰；其次，對具有鎖狀聯合并能出菇的異核體菌株，按第一代雜交菌株的菌絲在PDA平面培養基上,24℃生長速度為2cm?/24h以上，在PDA培養基上生長整齊進行篩選。

8.根據權利要求1所述的四極性食、藥用菌單孢雜交育種工藝，其特征在于，異核體菌株分離方法為，對產量和質量穩定的兩菌株進行子實體組織分離，制作菌種，與兩原單孢交配的菌株進一步同時栽培試驗，考察其穩定性和各項指標。