[發(fā)明專(zhuān)利]一種同時(shí)檢測(cè)水體中氧氟沙星和沙拉沙星的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310247241.1
• 申請(qǐng)日: 2013-06-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103344732A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 席北斗;盧義;許其功;丁京濤;高如泰;張慧;梁瓊;張媛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/88
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 中科專(zhuān)利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 周長(zhǎng)興

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于水環(huán)境污染物的檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種水體中兩種痕量氟喹諾酮類(lèi)抗生素含量的檢測(cè)方法，更具體地說(shuō)是針對(duì)地表水中痕量氧氟沙星、沙拉沙星的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

氟喹諾酮(FQs)類(lèi)抗生素藥物，是一類(lèi)人工合成的抗菌藥，對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌均具有良好的抗菌作用，因其具有組織穿透力強(qiáng)、低毒、更高的藥物耐受性和更長(zhǎng)的半衰期而被大量應(yīng)用。氟喹諾酮類(lèi)抗生素包括諾氟沙星(NOR)、環(huán)丙沙星(CIP)、氧氟沙星(OFL)、洛美沙星(LOM)、雙氟沙星(DIF)、沙拉沙星(SAR)等.雖然這類(lèi)化合物一部分可以被人體和牲畜體所吸收，以及在污水處理工藝中被去除，但仍有大量化合物被排放到水環(huán)境中。由于FQs在環(huán)境水體中含量低，僅為ng/L或μg/L級(jí)，以及樣品基質(zhì)的復(fù)雜性，使得建立可靠的分析方法十分困難，目前常用的FQs分析方法有液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS)、液相色譜-熒光法(HPLC-FLD)等.但是，高效液相色譜法和高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用。高效液相色譜法自動(dòng)化較高，重現(xiàn)性好，但是對(duì)于成分復(fù)雜的環(huán)境樣品，分離時(shí)間較長(zhǎng)，且不能排除雜質(zhì)的影響，準(zhǔn)確篩選出目標(biāo)化合物進(jìn)行定量。而高效液相色譜-電噴霧三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜在定量分析時(shí)可以根據(jù)特征離子和由此特征離子斷裂產(chǎn)生的特征碎片作為某一目標(biāo)化合物的指紋，將它從復(fù)雜機(jī)制的混合物樣品中篩選出來(lái)進(jìn)行定量，保證了檢測(cè)的準(zhǔn)確度和精確度。鑒于此，需建立一種經(jīng)濟(jì)、快速、靈敏、準(zhǔn)確的且能同時(shí)分析多種FQs的分析方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種同時(shí)檢測(cè)水體中氧氟沙星和沙拉沙星的方法，本發(fā)明采用高效液相色譜-電噴霧三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法實(shí)現(xiàn)對(duì)水環(huán)境樣品中痕量氟喹諾酮(FQs)類(lèi)抗生素的富集和定量測(cè)定，操作簡(jiǎn)單易行，分析快速準(zhǔn)確。檢測(cè)一個(gè)樣品僅需5min左右，能夠滿(mǎn)足環(huán)境樣品檢測(cè)的要求。同時(shí)，在我國(guó)對(duì)于地表水中多種FQs同時(shí)檢測(cè)的分析方法還少見(jiàn)報(bào)道。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的同時(shí)檢測(cè)水體中氧氟沙星和沙拉沙星的方法，主要步驟如下：

(1)水樣的預(yù)處理

用酸將水樣pH調(diào)至2-4，過(guò)濾，得到預(yù)處理后的水樣；

(2)濃縮富集

依次用丙酮、甲醇，含乙酸銨的甲酸水溶液活化HLB固相萃取柱，加超純水保持HLB固相萃取柱中樹(shù)脂處于活化狀態(tài)，取水樣過(guò)柱；

富集完成后，將HLB固相萃取柱在氮?dú)獗Ｗo(hù)下干燥，洗脫液洗脫，收集洗脫液并在氮?dú)饬飨麓蹈?，加入乙腈溶解殘留物待測(cè)；

(3)定量檢測(cè)氧氟沙星和沙拉沙星的濃度。

所述的檢測(cè)方法，其中，步驟1中水樣過(guò)濾是用0.47μm的GF/F濾膜。

所述的檢測(cè)方法，其中，步驟1中是加入鹽酸或硫酸調(diào)節(jié)水樣pH。

所述的檢測(cè)方法，其中，步驟2中甲酸水溶液含有體積比0.1％的乙酸銨。

所述的檢測(cè)方法，其中，步驟2中的水樣過(guò)柱控制流速為3.0-5.0mL/min。

所述的檢測(cè)方法，其中，步驟2中洗脫HLB固相萃取柱的洗脫液流速小于1.0mL/min。

所述的檢測(cè)方法，其中，步驟2中的洗脫液為含體積比5％氨水的甲醇溶液。

所述的檢測(cè)方法，其中，步驟3是采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)氧氟沙星和沙拉沙星的濃度。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1)檢測(cè)時(shí)間短。一個(gè)樣品僅需5min左右。

2)靈敏度高。檢出限僅為10～50ng/L，能夠滿(mǎn)足對(duì)水環(huán)境樣品中痕量氟喹諾酮類(lèi)抗生素的檢測(cè)要求。

3)對(duì)目標(biāo)化合物的選擇性強(qiáng)，定量精確。電噴霧串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀根據(jù)目標(biāo)化合物的母離子及經(jīng)碰撞產(chǎn)生的特征子離子進(jìn)行定量分析，排除了樣品中其他分子的干擾。

4)檢測(cè)方法對(duì)目標(biāo)化合物的線(xiàn)性關(guān)系好，回收率高，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較小。此法能夠排除復(fù)雜基質(zhì)的干擾，提取出目標(biāo)物質(zhì)，適用與簡(jiǎn)單基質(zhì)和復(fù)雜基質(zhì)。

5)該方法處理水樣過(guò)程所用的試劑低毒，使用量少，環(huán)境友好

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明100μg/L的兩種痕量氟喹諾酮類(lèi)抗生素混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液的離子流圖，出峰順序?yàn)檠醴承牵?.39min；沙拉沙星3.47min。

圖2為氧氟沙星定量子離子標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

圖3為沙拉沙星定量子離子標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的檢測(cè)方法如下：

(1)水樣預(yù)處理