[發明專利]一種核桃鞣質的制備方法

有效

• 申請號: 201310246195.3
• 申請日: 2013-06-20
• 公開（公告）號: CN103340923A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 楊衛民;杜京旗;高曉麗;閆艷華;趙君;劉永青
• 申請（專利權）人: 呂梁學院
• 主分類號: A61K36/52
• 分類號: A61K36/52;A61K131/00
• 代理公司: 太原科衛專利事務所(普通合伙) 14100
• 代理人: 朱源

技術領域

本發明涉及核桃青皮中化學物質的制備方法，具體為一種核桃鞣質的制備方法。

背景技術

核桃為胡桃科植物，核桃青皮又稱青龍衣，為核桃外部的一層厚厚綠色果皮，富含鞣質；鞣質具有收斂性，內服可治療胃腸道出血，潰瘍和水瀉等癥，外用于創傷、灼傷，鞣質能使創面的微血管收縮，有局部止血作用；鞣質還有抑菌作用，具抗病毒作用，鞣質可用作生物堿及某些重金屬中毒時的解毒劑；鞣質具較強的還原性，可清除生物體內的超氧自由基，延緩衰老；此外，鞣質還有抗變態反應、抗炎、驅蟲、降血壓等作用。現在常采用浸提法提取鞣質，浸提法所用的溶劑對鞣質有良好的溶解能力，不與鞣質發生化學反應，浸出的雜質少，易于分離；常用的溶劑有水，乙醇、甲醇、丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚等有機溶劑，有機溶劑和水的復合體系作溶劑也很普遍，一些科研人員還采用含亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉的水溶液提取鞣質。現在鞣質提取方法都存在提取率低的問題，且提取的鞣質中含有大量的糖、蛋白質、脂類等雜質，需要進一步分離純化。

發明內容

本發明為了解決現有方法對鞣質的提取率低和提取的鞣質含雜質較多的問題，提供了一種核桃鞣質的制備方法。

本發明是采用如下的技術方案實現的：

一種核桃鞣質的第一種制備方法，包括以下步驟：

剝取核桃青皮，在背陰處晾干；

干燥后粉碎，用40-80目的篩網過篩；

將過篩后的核桃青皮粉置于容器中，按固液質量比1:8-12的比例加入純水；

在上述溶液中加入濃度為1-2.5g/L以任意比混合的果膠酶和纖維素酶，以溶液和酶的體積比90-110:1的比例加入，將容器中溶液的pH值調至5.5-6.7后將容器密封，在30-50℃恒溫下振蕩處理36-60h；

在酶解后的溶液中以和明膠的體積比10:1-2的比例加入濃度為2%～5%明膠，然后振蕩10-15min，靜置、過濾得到沉淀物；

沉淀物和乙酸乙酯以固液質量比為1:5-8的比例混合；

將混入沉淀物的乙酸乙酯溶液加入到其內裝有25-45克氧化鋁粉末的層析柱中；

再在層析柱中加入濃度為70-90%的丙酮，丙酮以和層析柱中溶液的體積比為3:5-9的比例加入；

將溶液從層析柱中流出，減壓濃縮得到鞣質。

本發明提供了一種核桃鞣質的制備方法，先將核桃青皮在背陰處晾干，在背陰處核桃青皮不容易發生光氧化反應，青皮中的有效物質不容易揮發掉，青皮晾干后粉碎，用40-80目篩網過篩，使得青皮粉容易被酶分解，以及青皮粉和純水以質量比為1:8-12的比例混合，也是使得青皮粉容易被酶解，同時青皮粉配制成溶液選擇了純水，純水中的離子少，對青皮粉的酶解影響小；在溶液中加入的果膠酶分解核桃青皮細胞胞間層與初生壁，使天然果膠完全分解，破壞細胞壁結構，以達到分離細胞的目的；利用纖維素酶分解初生壁與次生壁中的纖維素分子，促進細胞內各種化學活性物質的釋放，而濃度為1-2.5g/L果膠酶和纖維素酶可以快速徹底得將核桃青皮酶解，而將溶液的pH調到5.5-6.7，且在30-50℃恒溫下反應，果膠酶和纖維素酶的活性最大，利于核桃青皮的酶解，本發明對核桃青皮的酶解選用了果膠酶和纖維素酶，是一種生物方法，且對果膠酶和纖維素酶的濃度做了優選，提高了鞣質的提取率，還不破壞其活性；酶解后的溶液中加入明膠，明膠能和鞣質結合成鞣質蛋白，鞣質蛋白為沉淀，過濾后得到鞣質蛋白，鞣質蛋白中的鞣質是鞣質粗提取物，需進一步提純，明膠和酶解后的溶液以體積比1-2:10的比例混合，確保能完全和鞣質結合，確保鞣質的提取率；含有鞣質蛋白的乙酸乙酯溶液加入含有氧化鋁粉末的層析柱中，而后加入的丙酮能將鞣質和蛋白質分開，氧化鋁能吸附掉溶液中的蛋白質等物質，被分解開的鞣質溶于乙酸乙酯與丙酮混合液中，丙酮以和乙酸乙酯溶液以體積比為3:5-9的比例混合，鞣質蛋白的分解率高，濃度為70-90%的丙酮分解鞣質蛋白的效果好；從層析柱中流出的溶液減壓蒸發后得到純度較高的鞣質。

一種核桃鞣質的第二種制備方法，包括以下步驟：沉淀物在和乙酸乙酯混合前先和氯仿以固液質量比為1:8-12的比例混合；再過濾得到沉淀物，再次得到的沉淀物和乙酸乙酯以固液質量比為1:5-8的比例混合。

氯仿能吸收掉鞣質粗提取物中的脂溶性物質，氯仿和沉淀物以固液質量比為1:8-12的比例混合，氯仿的吸收效果好，提高了制取的鞣質的純度。

一種核桃鞣質的第三種制備方法，包括以下步驟：酶解后的溶液中以和酶解后溶液的體積比為1:5-7的比例加入濃度為70-90%的丙酮；