[發明專利]人Lp?PLA2抗原表位肽、抗原、抗體、用途及試劑盒

有效

• 申請號: 201310242911.0
• 申請日: 2013-06-18
• 公開（公告）號: CN104231052B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 朱建安
• 申請（專利權）人: 深圳市安群生物工程有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K14/795;C07K16/40;G01N33/577;G01N33/573
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司11112
• 代理人: 丁業平,張天舒

技術領域

本發明屬于多肽化學和免疫學領域，具體涉及人脂蛋白相關磷脂酶A2（Lp-PLA2）抗原表位肽、用該抗原表位肽制備的Lp-PLA2特異性抗原和相應的單克隆抗體或多克隆抗體、所述抗體在制備人Lp-PLA2體外診斷試劑盒上的用途，人Lp-PLA2體外診斷試劑盒，以及一種用于定量檢測待測物中人Lp-PLA2蛋白的熒光免疫層析試紙及其制備方法。

背景技術

心腦血管疾病一直被公認為是危害人類健康的最大殺手之一，也是全球范圍內造成死亡的最主要原因。我國每年死于心腦血管疾病的人數高達300萬以上，現有患者超過6000萬人。近年來，隨著居民生活水平的不斷提高，自然環境的不斷惡化，各種人群的心腦血管疾病的患病率、發病率和死亡率都呈逐年上升的趨勢。尤其是中老年人的發病率高達62%，因此預防治療心腦血管疾病已經變得刻不容緩，它不僅關系到廣大人民群眾的健康生活問題，在一定程度上還影響著整個國家國民素質的整體情況。

心腦血管疾病的病理基礎是動脈粥樣硬化。近年來，研究發現動脈粥樣硬化是一種炎性反應性疾病，炎性細胞及其釋放的產物被認為是最主要的促動脈粥樣硬化的因素。在粥樣斑塊形成、進展和最終破裂的過程中均有炎性反應介質的參與。

因此，尋找一種能夠反應這種動態變化過程的介質尤為重要，目前國際上已經發現了一種新的炎性反應標志物，即脂蛋白相關磷脂酶A2（Lipoprotein-Associated Phospholipase A2，Lp-PLA2)。

脂蛋白相關磷脂酶A2，英文簡寫Lp-PLA2，屬于磷脂酶A2家族，主要由炎癥細胞（如巨噬細胞和淋巴細胞）分泌。Lp-PLA2是由441個氨基酸組成的蛋白質，分子量為45KDa。Lp-PLA2具有降解血小板活化因子的活性，又稱為血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）。80%的Lp-PLA2與低密度脂蛋白（LDL）結合，能水解低密度脂蛋白上的氧化卵磷脂，生成溶血卵磷脂和氧化型游離脂肪酸，后二者是促炎物質，因此Lp-PLA2具有促炎癥和促動脈粥樣硬化形成的作用。

當動脈粥樣硬化的炎癥發展到嚴重程度時，Lp-PLA2將會被大量釋放入血液中，致使其血液內的水平大幅增高，因此Lp-PLA2在血液中的濃度能夠反映動脈粥樣斑塊的炎癥程度。

因此，通過檢測血液中的Lp-PLA2，可以有效地了解動脈粥樣硬化斑塊的炎癥程度及其穩定性。這樣就可預警心肌梗死和腦血栓的發生，對預防心腦血管突發事件具有相當重要的意義。

檢測Lp-PLA2最理想的方法是免疫測定。因此，尋找合適的具有免疫原性的Lp-PLA2抗原表位肽、制備特異性的Lp-PLA2抗原及抗體即成為了重點。

發明內容

為解決上述現有技術中所存在的問題，本發明提供了一種人Lp-PLA2抗原表位肽，用該抗原表位肽制備的Lp-PLA2特異性抗原和相應的單克隆抗體或多克隆抗體，其在制備人Lp-PLA2體外診斷試劑盒上的用途，以及人Lp-PLA2體外診斷試劑盒。

具體而言，本發明提供了：

一種人Lp-PLA2抗原表位肽，其中所述Lp-PLA2抗原表位肽的氨基酸序列為如下兩者之一：

(1)Thr-Lys-Ile-Pro-Arg-Gly-Asn-Gly-Pro-Arg-Ser-Lys-Glu-Ser-Tyr；

(2)Tyr-Lys-Gly-Asp-Ile-Asp-Ser-Asn-Val-Ala-Ile-Asp-Leu-Ser-Asn。

本發明還提供了一種Lp-PLA2抗原，其是通過使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(1)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了一種Lp-PLA2抗原，其是通過使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(2)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了一種人Lp-PLA2抗體，其是由所述的Lp-PLA2抗原制備而成的單克隆抗體或多克隆抗體，其中所述Lp-PLA2抗原是通過使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(1)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了一種人Lp-PLA2抗體，其是由所述的Lp-PLA2抗原制備而成的單克隆抗體或多克隆抗體，其中所述Lp-PLA2抗原是通過使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(2)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了根據所述的人Lp-PLA2抗體在制備人Lp-PLA2體外診斷試劑盒上的用途。

本發明還提供了一種人Lp-PLA2體外診斷試劑盒，其包含所述的人Lp-PLA2抗體作為包被抗體，其中所述包被抗體優選為單克隆抗體。