[發明專利]一種鏈霉素高產菌株及其篩選方法

有效

• 申請號: 201310242675.2
• 申請日: 2013-06-19
• 公開（公告）號: CN103289938A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 賈曉樂;劉麗芳
• 申請（專利權）人: 河北圣雪大成制藥有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N15/01;C12N13/00;C12R1/545
• 代理公司: 石家莊國域專利商標事務所有限公司 13112
• 代理人: 白海靜

1.一種鏈霉素高產菌株，其特征在于該菌株的名稱為灰色鏈霉菌(Streptomycesgriseus)?DC622，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?NO.6219??，保藏日期為2012年06月14日。

2.根據權利要求1所述的鏈霉素高產菌株，其特征在于所述其形態特征外在表現色為白色，形狀近似梅花狀，菌落中心凹陷。

3.根據權利要求1所述鏈霉素高產菌株的篩選方法，其特征在于包括以下步驟：

a、取鏈霉素出發菌株接種于斜面培養基，在溫度27.0±1.0℃、相對濕度30%-60%的條件下培養5-8天，挑選斜面培養基上的孢子，加入生理鹽水，制成孢子濃度為10⁷-10⁹個/mL的孢子懸浮液；

b、使用微波對孢子懸浮液進行誘變40秒，然后再對其進行紫外光照射120秒，避光培養30?分鐘，得到誘變孢子液；

c、將誘變孢子液接種到釩酸鈉濃度為0.3-0.7?mg/mL的液體培養基中，在溫度27.0±1.0℃、相對濕度30%-60%條件下，180?rpm震蕩培養15-28?h，分離后得到分離菌株，將分離菌株接種到釩酸鈉濃度為0.5-1.0?mg/mL的固體雙碟培養基上，在溫度27.0±1.0℃，相對濕度30%-60%條件下培養2-3天，得到耐高磷菌株，再將耐高磷菌株轉接到含硫氨基酸濃度為0.03-0.07?mg/mL的固體雙碟培養基上，在溫度27.0±1.0℃、相對濕度30%-60%條件下培養5天，得到成熟的單菌落；

d、將單菌落轉接到斜面培養基上，在溫度27.0±1.0℃，自然濕度條件下培養5-7天得到成熟的斜面孢子，使用液氮保存成熟孢子；

e、將保存的成熟孢子轉接到液體培養基中，在溫度27.0±1.0℃、自然濕度（具體數值？）的條件下，180?rpm震蕩培養8-10天，篩選出發酵產率的菌株進行保藏??即獲得灰色鏈霉菌(Streptomycesgriseus)?DC622。

4.權利要求2所述鏈霉素高產菌株的篩選方法，其特征在于，所述步驟（2）中所述微波，其頻率為300MHz，微波處理時間30-50?s，所述紫外光的波長為257.3nm，紫外燈的功率為15W，紫外處理時間100-140?s。

5.權利要求2所述鏈霉素高產菌株的篩選方法，其特征在于，步驟（3）中所述的含硫氨基酸為蛋氨酸、半胱氨酸和胱氨酸中的任意一種。

6.權利要求2所述鏈霉素高產菌株的篩選方法，其特征在于，方法中所述的斜面培養基、固體雙碟培養基，按質量比計，其組成為酵母膏100-150份，葡萄糖100-120份，磷酸氫二鉀5-8份，硫酸鎂5-8份，瓊脂200-250份；用20%氫氧化鈉溶液將培養基的pH值調節至6.7±0.1。

7.權利要求2所述鏈霉素高產菌株的篩選方法，其特征在于，所述液體培養基，按質量體積比計算，其成分為：酵母膏6.0-8.0%，葡萄糖6.0-8.0%，磷酸二氫鉀0.8-1.2%，硫酸鎂?0.05-0.08%，其余為水；用20%氫氧化鈉溶液將培養基的pH值調節至7.0±0.1。