[發明專利]一種生物樣品純化的裝置及其應用

有效

• 申請號: 201310237476.2
• 申請日: 2013-06-14
• 公開（公告）號: CN104236984B
• 公開（公告）日: 2017-11-21
• 發明（設計）人: 張麗華;趙群;楊開廣;吳慈;張玉奎
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: G01N1/34
• 分類號: G01N1/34
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司21002
• 代理人: 馬馳

1.一種生物樣品純化的裝置，其特征在于：

包括兩根捕集柱和連接件，于強陽或強陰離子交換捕集柱(3)中填充強陽或強陰離子交換材料，于反相捕集柱(5)中填充反相材料，兩根捕集柱間用保護柱與分析柱連接件(4)連接；

樣品固載過程中，于強陽/強陰離子交換捕集柱(3)的遠離反相捕集柱(5)的一端設有進樣頭(2)，進樣頭(2)與注射器(1)相連；反相捕集柱(5)的遠離強陽/強陰離子交換捕集柱(3)的一端與廢液管(6)相連；該裝置的連接順序從進樣端開始依次為：注射器(1)與進樣頭(2)相連，進樣頭(2)與強陽/強陰離子交換捕集柱(3)相連，強陽/強陰離子交換捕集柱(3)與保護柱與分析柱連接件(4)相連，保護柱與分析柱連接件(4)與反相捕集柱(5)相連，反相捕集柱(5)與廢液管(6)相連；生物樣品采用注射針(1)，通過進樣頭(2)注入，先后通過兩根捕集柱(3)和(5)，并保留于反相捕集柱(5)上；

最后，將樣品從反相捕集柱上洗脫下來，收集洗脫液，即為純化后的生物樣品；樣品洗脫過程中，從裝置上取下反相捕集柱(5)，于反相捕集柱(5)一端設有進樣頭(2)，進樣頭(2)與注射器(1)相連；反相捕集柱(5)的另一端與收集管(7)相連，該裝置的連接順序從進樣端開始依次為：注射器(1)與進樣頭(2)相連，進樣頭(2)與反相捕集柱(5)相連，反相捕集柱(5)與收集管(7)相連。

2.根據權利要求1所述的裝置，其特征在于：

強陽/強陰離子交換捕集柱(3)和反相捕集柱(5)的柱管內部為橫截面直徑為0.3-7mm的圓柱體，柱管長度為0.5-3cm，材質為拋光不銹鋼或石英毛細管或塑料；于捕集柱的內部二端均設有篩板，篩板孔徑為3nm-20μm。

3.根據權利要求1所述的裝置，其特征在于：

根據權利要求1所述的裝置，其特征在于：強陽離子交換材料為含有磺酸基團或磷酸基團的硅膠，或強陽離子交換材料為含有磺酸基團或磷酸基團的聚合物基質材料，其中聚合物基質是聚丙烯酸酯類基質、聚苯乙烯類基質、聚丙烯酰胺類基質中任意一種；

強陰離子交換材料是含有季銨基團的硅膠，或強陰離子交換材料是含有季銨基團的聚合物基質材料，其中聚合物基質是聚丙烯酸酯類基質、聚苯乙烯類基質、聚丙烯酰胺類基質中任意一種；

反相材料是含有C4、C8、C12或C18基團的硅膠，或反相材料是含有C4、C8、C12或C18基團的聚合物基質材料，其中聚合物基質是聚丙烯酸酯類基質、聚苯乙烯類基質、聚丙烯酰胺類基質中任意一種。

4.一種權利要求1、2或3所述裝置的應用，其特征在于：

所述裝置用于生物樣品的純化。

5.根據權利要求4所述裝置的應用，其特征在于：

所述生物樣品為含有表面活性劑和鹽的生物樣品，為：細胞提取液、胞漿提取液、血漿提取液、蛋白質溶液、或多肽溶液。

6.根據權利要求5所述裝置的應用，其特征在于：

單次注入樣品，即可完成表面活性劑和鹽類的同時去除。

7.根據權利要求4所述裝置的應用，其特征在于：需要純化的生物樣品中同時含有兩大類物質，一類是陽離子或陰離子表面活性劑或構成表面活性劑的離子液體，其中陽離子表面活性劑是胺鹽型表面活性劑、季銨鹽型表面活性劑、雜環類陽離子表面活性劑、鎓鹽型表面活性劑中一種或幾種；陰離子離子液體是磺酸鹽型、羧酸鹽型、硫酸酯鹽型、磷酸酯鹽型表面活性劑中一種或幾種；構成表面活性劑的離子液體是咪唑類離子液體、吡啶類離子液體、季銨鹽離子液體、季鏻鹽離子液體、吡咯鹽離子中一種或幾種；另一類是鹽類，其中鹽類是尿素、三羥甲基氨基甲烷-鹽酸鹽、鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、醋酸鹽、甲酸鹽、碳酸鹽、磷酸鹽中一種或幾種；

若生物樣品中含有陽離子表面活性劑和鹽類或構成表面活性劑的離子液體和鹽類，則靠近注射器一側的捕集柱中填裝強陽離子交換材料，生物樣品的pH需調節至pH≥8；

若生物樣品中含有陰離子表面活性劑和鹽類，則靠近注射器一側的捕集柱中填裝強陰離子交換材料,生物樣品的pH需調節至pH≤4。