[發(fā)明專利]一種豬圓環(huán)病毒樣顆粒及其疫苗和制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310230557.X
• 申請日: 2013-06-09
• 公開（公告）號: CN103436499A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李陽春;曹政
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶澳龍生物制品有限公司
• 主分類號: C12N7/04
• 分類號: C12N7/04;A61K39/12;A61K39/39;A61P31/20
• 代理公司: 北京匯澤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11228
• 代理人: 張瑾

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物制藥領(lǐng)域，涉及一種豬圓環(huán)病毒樣顆粒，特別涉及一種病毒樣顆粒疫苗及其疫苗的制備方法。?

背景技術(shù)

豬圓環(huán)病毒(Porcine?circovirus，PCV)是一種導(dǎo)致豬群免疫力下降的病毒，并與豬斷奶后多系統(tǒng)衰弱綜合癥(Postweaning?Multisystemic?Wasting?Syndrome，PMWS)、豬皮炎及腎病綜合癥(Porcine?Dermatitis?and?Nephropathy?Syndrome，PDNS)、豬繁殖障礙(Porcine?reproductive?failure)、豬呼吸道疾病綜合征(Porcine?Respiratory?Disease?Syndrome，PRDC)、豬增生性壞死性肺炎(Porcine?Necrotizing?Pneumonia，PNP)、豬先天性振顫(Porcine?Congenital?Tremor，CT)等多種疾病有著聯(lián)系。PCV是1974年在一種體外培養(yǎng)的豬腎細(xì)胞系PK-15中首次發(fā)現(xiàn)的，當(dāng)時認(rèn)為是一種細(xì)胞培養(yǎng)的污染物，因為其并不具有導(dǎo)致細(xì)胞病變等典型的病毒樣作用，所以稱為小病毒樣核酸污染物。隨后陸續(xù)有報道指出這種小病毒樣核酸污染物其實是一種病毒，這種病毒是一種小型無包膜的12面體病毒，核心包含一個單股環(huán)狀DNA基因組，不導(dǎo)致動物發(fā)病及傳代培養(yǎng)的細(xì)胞發(fā)生病變，并正式將其命名為豬圓環(huán)病毒。1994年Hines等人首先報道了在患有先天性振顫(Congenital?Tremor)的仔豬中發(fā)現(xiàn)了PCV樣病毒(PCV-likeVirus)，1995年Allan等人也在幾例豬的死產(chǎn)的(Stillborn)死胎中發(fā)現(xiàn)了PCV的抗體，這將PCV與各種疾病聯(lián)系到了一起。之后對PCV的報道漸漸指向了一種分離自病豬而不是細(xì)胞培養(yǎng)物的“新型豬圓環(huán)病毒(Novel?PCV)”。隨著對這種新型PCV的研究逐漸深入，發(fā)現(xiàn)從基因組到血清型都與傳統(tǒng)的PCV存在差異，隨之國際上將這種新型的、可以致病的豬圓環(huán)病毒命名為2型豬圓環(huán)病毒(PCV-2)，同時將細(xì)胞培養(yǎng)物中發(fā)現(xiàn)的非致病性豬圓環(huán)病毒命名為1型豬圓環(huán)病毒(PCV-1)。?

在臨床中，PCV-2主要感染5-12周齡的小豬，病豬表現(xiàn)為生長緩慢、被毛粗亂、營養(yǎng)不良、呼吸困難、黃膽、粘膜蒼白，可成為僵豬，嚴(yán)重可導(dǎo)致死亡。有證據(jù)表明，PCV-2的致病性主要是由于其對免疫系統(tǒng)的損傷造成的，研究發(fā)現(xiàn)，感染PCV-2的病豬淋巴細(xì)胞會發(fā)生明顯減少。Darwich等報道，患有豬斷奶后多系統(tǒng)衰弱綜合癥(Postweaning?Multisystemic?Wasting?Syndrome，PMWS)的病豬出現(xiàn)CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞減少，CD8+T淋巴細(xì)胞沒有發(fā)生明顯變化，而典型的由PCV-2感染而引起PMWS病癥的患豬出現(xiàn)了CD8+T淋巴細(xì)胞的減少。而且有證據(jù)表明PCV-2在淋巴器官中的數(shù)量與患豬淋巴細(xì)胞的消耗以及外周血中IgM及CD8+T淋巴細(xì)胞的減少有著直接的關(guān)系。Nielsen等人報道，患豬在PCV-2感染10天后淋巴細(xì)胞開始減少，在第14天時出現(xiàn)顯著下降，且這種下降會一直持續(xù)到患豬死亡。而且通過試驗證實，所有的T淋巴細(xì)胞亞群都會由于PCV-2的感染而出現(xiàn)數(shù)量上的減少。Sarli等人報道，PCV-2對淋巴細(xì)胞的消耗還包括樹突狀細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，同時Chianini等人根據(jù)B淋巴細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞數(shù)量的下降程度，將其分為輕度損傷、中度損傷以及重度損傷，其中重度損傷可致淋巴細(xì)胞徹底消失。這充分說明了PCV-2的感染可導(dǎo)致免疫機能下降，同時也為患豬由于PCV-2的感染并與其他病原體的并發(fā)感染而導(dǎo)致諸如PMWS一類疾病的發(fā)生提供了理論依據(jù)。研究發(fā)現(xiàn)，PCV-2的感染通常伴隨豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬繁殖與呼吸綜合癥病毒(PRRSV)、豬細(xì)小病毒(PCV)、豬瘟病毒(CSFV)、卡氏肺囊蟲(Pneumocystis?carinii)、衣原體(Chlamydia?spp.)、肺曲霉病(pulmonary?aspergillosis)、隱孢子蟲(Cryptosporidium?parvum)等共同感染而引起疾病的發(fā)生。其中PCV-2感染作為主要病因的?疾病是豬斷奶后多系統(tǒng)衰弱綜合癥(Postweaning?Multisystemic?Wasting?Syndrome，PMWS)，在PCV-2感染的同時通常伴隨有PRRSV及PPV的感染，而且在實驗室中PCV-2的單獨感染也可造成PMWS的典型癥狀。?