[發明專利]一種從赭色小莫勒菌中提取白僵菌交酯Ⅰ的方法

有效

• 申請號: 201310229991.6
• 申請日: 2013-06-09
• 公開（公告）號: CN103276037A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 邱君志;張以盼;郭慶豐;何肖云;姚靈丹;李小霞;凃潔;董冬;孟麗雪;曹麗萍
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12P21/04
• 分類號: C12P21/04;C07K11/00;C07K1/16;C12R1/645
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種從赭色小莫勒菌中提取白僵菌交酯Ⅰ的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）將赭色小莫勒菌活化后，取菌塊接種到PDB培養基中，在160r/min、25℃條件下連續培養7天即初級培養，按10％接種量再次轉接到PDB培養基中，繼續在160r/min、25℃條件下連續培養28天即次級培養；

2）減壓抽濾得到菌絲體，菌絲體在40℃下恒溫干燥后研磨成粉狀，過篩，用乙酸乙酯浸泡，超聲，重復3次，合并浸泡液，旋蒸得菌絲體浸膏；

3）將菌絲體浸膏上200~300目硅膠柱，進行粗分，先用石油醚洗脫，之后換石油醚：二氯甲烷體積比=5:1洗脫，收集該部位洗脫液，旋蒸濃縮；

4）將步驟3）中得到的濃縮物繼續上200~300目硅膠柱，以石油醚：丙酮體積比=20:1梯度洗脫，收集石油醚：丙酮體積比=10:1部位洗脫液，旋蒸濃縮；

5）將步驟4）中得到的濃縮物進一步上200~300目硅膠柱，先以石油醚洗脫，之后換石油醚：丙酮體積比=8：1梯度洗脫，最后以乙酸乙酯：丙酮體積比=5:1梯度洗脫，收集乙酸乙酯：丙酮體積比=1:1部位洗脫液，旋蒸濃縮，無水硫酸鈉干燥，過濾濃縮后所得黃色產物，用氯仿：甲醇體積比＝1∶1重結晶，得到白色固體。

2.根據權利要求1所述的從赭色小莫勒菌中提取白僵菌交酯Ⅰ的方法，其特征在于：所述步驟1）中接種菌塊的大小為0.5×0.5cm，接種量為4塊。

3.根據權利要求1所述的從赭色小莫勒菌中提取白僵菌交酯Ⅰ的方法，其特征在于：所述步驟2）中要用3倍體積乙酸乙酯浸泡24小時，超聲1小時。