[發(fā)明專利]巖藻聚糖硫酸酯及其制備方法和在制備抗糖尿病的α-糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310228728.5
• 申請(qǐng)日: 2013-06-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103288978A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于廣利;郝杰杰;劉鑫;趙小亮;焦廣玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61K31/715;A61P3/10
• 代理公司: 青島聯(lián)智專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 37101
• 代理人: 王曉曉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于海洋藥物領(lǐng)域，尤其涉及一種巖藻聚糖硫酸酯及其制備方法和在制備抗糖尿病α-糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著人們生活習(xí)慣和膳食結(jié)構(gòu)的變化，糖尿病的發(fā)病率急劇上升。2011年WHO發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，每年全世界大概有460萬(wàn)人死于糖尿病相關(guān)的疾病，用于糖尿病的醫(yī)療費(fèi)用高達(dá)4650億美元。龐大的糖尿病群體給全球帶來(lái)巨大的挑戰(zhàn)。目前，中國(guó)有9000余萬(wàn)名糖尿病患者和超過(guò)1億的糖尿病前期患者，總?cè)丝诘?5%存在糖尿病代謝異常現(xiàn)象，糖尿病患病率高達(dá)9.7%，中國(guó)已超越印度成為世界糖尿病人數(shù)最多的國(guó)家。

糖尿病是一種病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明的代謝性疾病，患者機(jī)體內(nèi)糖、脂肪和蛋白質(zhì)代謝發(fā)生紊亂，會(huì)造成機(jī)體多個(gè)組織產(chǎn)生系列并發(fā)癥。幾乎75-80%的糖尿病病人死于心血管疾病，而且糖尿病病人比非糖尿病病人得冠心病的幾率要高2-4倍，糖尿病導(dǎo)致的死亡使患病人群的預(yù)期壽命減少了12-14年，并且生活質(zhì)量大為降低。目前，WHO將糖尿病分為3類，包括I型糖尿病、II型糖尿病和妊娠期糖尿病，其中II型糖尿病的發(fā)病率大約占糖尿病病人總數(shù)的90%左右。

目前為止，臨床上用于治療2型糖尿病的主要藥物包括雙胍類、磺酰脲類、噻唑烷二酮類、胰高血糖素樣肽類似物1、二肽基肽酶IV抑制劑、α-糖苷酶抑制劑等。但這些藥物常會(huì)出現(xiàn)不同的副作用，個(gè)別藥物發(fā)生繼發(fā)性失效，甚至可能導(dǎo)致低血糖癥和肝腎疾病等。因此急需研發(fā)高效低毒的抗2型糖尿病藥物。目前臨床上應(yīng)用的α-糖苷酶抑制劑主要有阿卡波糖，伏格列波糖，米格列醇，其中阿卡波糖已經(jīng)被推薦為治療2型糖尿病的一線用藥，成為治藥物中的主力，可見(jiàn)α-糖苷酶抑制劑的篩選是發(fā)現(xiàn)糖尿病治療藥物的重要方法。

近年來(lái)，巖藻多糖抗糖尿病的活性備受關(guān)注。經(jīng)過(guò)近10年國(guó)內(nèi)外研究論文和專利查新檢索表明，在提取分離和制備巖藻聚糖方面的資料較多。專利CN201010157935.2公開(kāi)了一種巖藻半乳聚糖硫酸酯的提取分離純化方法，專利CN201010218084.8公開(kāi)了一種巖藻糖含量為25-35%的褐藻多糖硫酸酯的制備方法，專利200410023694.7公開(kāi)了一種高硫酸根含量巖藻聚糖硫酸酯的制備方法，但是這些方法或者使用加酸來(lái)提取巖藻聚糖，或者步驟復(fù)雜，提取率低，對(duì)多糖結(jié)構(gòu)破壞較大且污染環(huán)境。而專利CN200510047582.X和CN01811618.3提供了巖藻聚糖硫酸酯的酶解制備方法，但其反應(yīng)條件苛刻，生產(chǎn)成本很高。

國(guó)內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)報(bào)道了一些關(guān)于海藻多糖及其寡糖抗2型糖尿病的研究。雖然海帶中巖藻聚糖硫酸酯（Huang,et?al.2010）和低分子量的石莼膠（Yu,et?al.2003）被發(fā)現(xiàn)能降低動(dòng)物模型中血清的總膽固醇（TCH）、低密度脂蛋白（LDL-CH）和甘油三酯（TG）的含量，且升高高密度脂蛋白（HDL-CH）含量，但是目前還沒(méi)有關(guān)于巖藻聚糖硫酸酯抑制α-糖苷酶活性的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中制備巖藻聚糖硫酸酯存在的上述缺點(diǎn)，本發(fā)明提供了一種巖藻聚糖硫酸酯及其制備方法和在制備抗糖尿病的α-糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用，所述巖藻聚糖硫酸酯的制備方法包括無(wú)污染、破壞性小、生產(chǎn)成本低廉的水提和弱堿提、乙醇分級(jí)、氯化鈣沉淀等步驟。同時(shí)，本發(fā)明提供了巖藻聚糖硫酸酯在制備抗糖尿病的α-糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

巖藻聚糖硫酸酯，它的結(jié)構(gòu)式如下：

其中所述R=OH或SO₃^-，所述R₁=H、SO₃^-或寡聚木糖，所述R₂=H、SO₃^-或寡聚半乳糖，n=25-500，

所述巖藻聚糖硫酸酯包括α-1,3-或α-1,4-連接的L-巖藻糖、1→4連接的β-木糖、1→3或1→4連接的β-半乳糖,其中單糖組成中巖藻糖含量為53.7-80.6%、木糖為6.2-14.3%、余量為半乳糖，重均分子量為10kD-500kD，硫酸根含量為17.1-38.2%。

本發(fā)明提供了所述巖藻聚糖硫酸酯的制備方法，它包括以下步驟：

(1)水和弱堿提取：將褐藻脫脂所得的粉末經(jīng)水提取后，經(jīng)弱堿溶液于恒溫水浴下攪拌提取，合并獲得多糖水溶液；

(2)乙醇分級(jí)：所述步驟(1)中多糖水溶液經(jīng)蒸發(fā)濃縮后，利用乙醇分級(jí)，離心取沉淀溶解為質(zhì)量比為1%-4%的水溶液；