[發明專利]銀耳菌株離子束注入誘變選育方法及所育的一個銀耳菌株

有效

• 申請號: 201310228604.7
• 申請日: 2013-06-08
• 公開（公告）號: CN103270945A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 劉桂君;尚宏忠;顧海科;吳美欽;李庭偉;周思靜;孟佑婷;楊素玲;溫賢芳
• 申請（專利權）人: 北京市輻射中心;古田縣州洋農業科技有限公司
• 主分類號: A01H1/06
• 分類號: A01H1/06;A01G1/04;A01H15/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

技術領域

本發明屬于食用菌培育領域，特別涉及銀耳菌株離子束注入誘變選育方法及所育的一個銀耳菌株。

背景技術

銀耳又稱白木耳，屬于菌物界，擔子菌門，銀耳綱，銀耳目，銀耳科，銀耳屬，是一種珍貴的藥食兼用的膠質菌，營養價值十分豐富。我國是銀耳的主要生產國，出口量約占世界銀耳貿易量的90％以上。目前銀耳現有栽培品種主要有黃色銀耳和白色銀耳兩種，主要來自于野生銀耳菌種的長期馴化及人工選擇，這種傳統的銀耳菌種選育方法培育出的銀耳菌種產量不高，且容易退化，不穩定。目前迫切需要發掘高產、穩定、品質優良的銀耳菌種資源，提高銀耳產量的同時提升銀耳品質。

離子束注入誘變技術是20世紀80年代由中國科學院余增亮等人首先應用于農作物育種中，用于選育水稻、小麥、玉米等農作物，隨著技術的發展，逐漸應用于微生物誘變育種研究，并且成功選育花生四烯酸生產菌株等，是一種有效的育種手段。離子束注入誘變技術與傳統的紫外線、X射線、γ射線等相比，除了具有能量沉積外，還有動量傳遞，質量沉積及電荷交換等效應。加之可根據不同的誘變育種需要，選用不同種類的離子、能量、劑量進行組合，因而具有突變譜廣、突變率高、突變體遺傳穩定性高、回復突變率低等優點。現有文獻報道，全衛豐等人發明的專利CN102067788B公開了一種低能N⁺離子束注入誘變選育靈芝菌株的方法，并成功的選育出了一株高產的靈芝菌株。

尚未見到有關采用離子束注入技術誘變選育銀耳的任何報道。一般來說不同種類的微生物，細菌類菌體細胞的大小和細胞壁的薄厚不同、真菌類孢子大小和孢子壁薄厚不同，因此對離子束注入能量、劑量的耐受程度不同，存活率和突變率也不一致，會使得不同種類的微生物具有不同的最佳誘變條件，在此條件下能夠得到較高的突變率，能夠篩選得到較多的突變菌株，尤其是我們想要得到的正突變菌株，這種方法是不能從一種微生物照搬到另外一種微生物的。

因此本發明針對銀耳菌株進行離子束注入技術誘變是一項創造性工作，選育得到的菌株為目前市場上不能獲得的菌株。

發明內容

為開拓銀耳菌種選育的新途徑，發掘高產、穩定、品質優良的銀耳菌種，本發明的目的在于提供銀耳菌株離子束注入誘變選育方法及所育的一個銀耳菌株。

本發明提供一種銀耳菌株離子束注入誘變選育方法，包括如下步驟：

1）用無菌水洗下銀耳出發菌株新鮮耳片上的擔孢子，涂布到金屬培養皿上，無菌風吹干；

2）真空條件下，對金屬培養皿上的銀耳擔孢子進行低能N⁺離子束注入誘變，能量為30kev，真空度為10^-3Pa，采用連續注入方式，輻射誘變劑量為1×10¹⁵-2.5×10¹⁵ions/cm²；

3）培養誘變后的銀耳擔孢子，篩選菌體干重比銀耳出發菌株高的銀耳菌株；

4）將步驟3）篩選到的銀耳菌株和香灰菌菌株配對后栽培，測定栽培后的產量，篩選產量提高的菌株，并分離保存菌株。

步驟1）所述出發菌株為產量高、品質好的現有銀耳菌株。

步驟1）所述銀耳出發菌株新鮮耳片，為出發菌株瓶栽獲得的新鮮干凈的銀耳耳片。

步驟1）所述涂布，用玻璃棒或金屬棒涂布。

本發明還提供所述銀耳菌株離子束注入誘變選育方法在銀耳菌株選育中的應用。

以本發明銀耳菌株離子束注入誘變選育方法選育的一個銀耳菌株（Tremella?fuciformis），其保藏號為CGMCC?No.7458，于2013年4月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101。

所述保藏號為CGMCC?No.7458的銀耳菌株遺傳性狀穩定，產量比原菌株提高13.5%，銀耳多糖含量提高5.41%。

本發明還提供所述銀耳菌株作為栽培菌株的應用。

本發明的有益效果：

本發明的銀耳菌株離子束注入誘變選育方法，摸索到了針對銀耳菌株的離子束注入誘變的最佳劑量，以本發明的方法誘變銀耳菌株，能篩選到更多高產的銀耳突變菌株，大大拓寬了銀耳菌株選育的范圍。

本發明所述的保藏號為CGMCC?No.7458的銀耳菌株遺傳性狀穩定，產量比原菌株提高13.5%，銀耳多糖含量提高5.41%，是優良的銀耳菌株。

附圖說明

圖1為本發明實施例1離子束注入劑量對銀耳孢子存活率的影響曲線圖。