[發(fā)明專利]基于血清表面增強(qiáng)拉曼光譜的腮腺腫瘤診斷技術(shù)

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310228012.5
• 申請日: 2013-06-08
• 公開（公告）號: CN104142320A
• 公開（公告）日: 2014-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李龍江;閆冰
• 申請（專利權(quán)）人: 李龍江;閆冰
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域

腮腺腫瘤是唾液腺腫瘤中最常見的一類，占唾液腺腫瘤的64%~80%，近年來發(fā)病率呈逐年增加的趨勢。腮腺腫瘤組織病理分類復(fù)雜，腫瘤類型眾多，根據(jù)《世界衛(wèi)生組織腫瘤分類（2005年版）：頭頸部腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)》中的唾液腺腫瘤組織病理學(xué)分類，腮腺腫瘤病理分類包括良性腫瘤、惡性腫瘤、軟組織腫瘤、淋巴造血系統(tǒng)腫瘤及繼發(fā)腫瘤五大類41種。這給臨床醫(yī)師和病理醫(yī)師在診斷和鑒別診斷腮腺腫瘤帶來困難，而由于腮腺腫瘤禁止常規(guī)術(shù)前活檢，對其術(shù)前診斷則更加困難。

隨著外科技術(shù)的不斷發(fā)展，功能性外科或保存性外科的概念被越來越多的提倡，即在治療疾病的同時盡可能保存組織和恢復(fù)器官的功能。就腮腺腫瘤手術(shù)而言，針對一些良性腫瘤，腫瘤的包膜外切除術(shù)被更多的頭頸外科醫(yī)師提倡，相比傳統(tǒng)的腮腺腫瘤及腺體淺葉或全葉切除術(shù)，腮腺腫瘤包膜外切除術(shù)可以盡可能多地保存腮腺組織，恢復(fù)腮腺功能，減少術(shù)后面癱、味覺出汗綜合癥等術(shù)后并發(fā)癥。但是這項手術(shù)開展的前提必須基于腮腺腫瘤要有明確的術(shù)前診斷。另外一方面，在臨床工作中，由于腮腺腫瘤與面神經(jīng)粘連，在無法明確腫瘤病理類型或良惡性質(zhì)的情況下，對面神經(jīng)的切除與保留也常常困擾頭頸外科醫(yī)師。

綜上，腮腺腫瘤術(shù)前診斷較為困難，但明確的術(shù)前診斷或腫瘤良惡性的判別又對腮腺腫瘤的治療有積極作用。目前，應(yīng)用于腮腺腫瘤術(shù)前診斷的技術(shù)和方法有影像學(xué)方法如B超、CT、MRI等，病理學(xué)方法如細(xì)針針吸活檢技術(shù)等，但都有其局限性和缺點(diǎn)。影像學(xué)方法更多的是提供腫瘤與周圍組織解剖結(jié)構(gòu)關(guān)系，對于具體的病理診斷無法提供足夠的資料，更多的依靠影像科醫(yī)師的主觀臨床經(jīng)驗(yàn)。而細(xì)針針吸活檢技術(shù)的診斷準(zhǔn)確率常常取決于穿刺操作者的技術(shù)和病理醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)，并不能夠?yàn)樾g(shù)前診斷提供一個穩(wěn)定客觀的參考，同時穿刺技術(shù)本身屬于一個有創(chuàng)操作，會對腫瘤產(chǎn)生刺激，引起腫瘤的播散、穿刺區(qū)的感染等并發(fā)癥。因此，尋找一個無創(chuàng)、快速、便捷、客觀的診斷新技術(shù)、新方法對腮腺腫瘤術(shù)前診斷及治療都具有重要的臨床意義和價值。

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背景技術(shù)

腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展與細(xì)胞內(nèi)外的生化物質(zhì)改變及代謝關(guān)系密切，特別是在發(fā)生形態(tài)學(xué)變異前，腫瘤細(xì)胞的生化物質(zhì)結(jié)構(gòu)、成分及代謝等已經(jīng)發(fā)生明顯變化，主要反映在細(xì)胞及體液的蛋白質(zhì)構(gòu)象的改變、核酸含量的異常及脂類代謝變化等，產(chǎn)生很多具有重要價值的生物標(biāo)記物，如前列腺特異性抗原PSA，肝癌的AFP等，其都已作為相關(guān)疾病診斷及評價預(yù)后的重要指標(biāo)和參照。在腮腺腫瘤中，某些生物標(biāo)志物結(jié)構(gòu)變化或代謝異常等，發(fā)生在細(xì)胞形態(tài)尚未發(fā)生病理性改變之前且存在于腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展的整個進(jìn)程之中，這使得作為腫瘤細(xì)胞代謝大環(huán)境的體液成分和組成也發(fā)生相應(yīng)的變化，甚至包含某些惡性腫瘤的分子標(biāo)志物或代謝產(chǎn)物，使得體液如血液、唾液等研究也成為早期篩查診斷疾病一種途徑。但是目前對腫瘤疾病生物標(biāo)志物的篩查技術(shù)如代謝組學(xué)技術(shù)、蛋白組學(xué)技術(shù)、基因組學(xué)技術(shù)等由于其對樣本處理要求高，操作繁瑣耗時，費(fèi)用昂貴等因素，給大樣本量的實(shí)驗(yàn)研究帶來了瓶頸限制。

????拉曼光譜技術(shù)，其原理基于非彈性散射，即根據(jù)分子振動形成的光散射頻率改變來反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)、基團(tuán)的組成等信息，具有高靈敏性和特異性，同時其樣本無需特殊處理、適用范圍廣泛、測試快捷等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。拉曼光譜技術(shù)具有其他光譜技術(shù)無法比擬的優(yōu)勢，如譜峰較紅外光譜分辨率高，不受水分干擾，成像實(shí)時快速等，特別適用于對紅外光譜干擾較強(qiáng)的含有大量水分的生物樣本研究，可以提供大量關(guān)于細(xì)胞、組織或體液內(nèi)分子構(gòu)成、分子結(jié)構(gòu)和分子之間相互作用的信息，反映蛋白質(zhì)、核酸、脂類等物質(zhì)成分變化、結(jié)構(gòu)改變等，被稱為分子指紋技術(shù)。但是由于拉曼信號較弱，易受背景熒光干擾，所以限制其在成分復(fù)雜的生物樣本檢測的應(yīng)用。而表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)的引入解決了以上問題。表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)的原理簡單闡述為拉曼散射強(qiáng)度與分子所處局部光電磁場強(qiáng)度平方成正比，具有納米級粗糙結(jié)構(gòu)的金屬基底在入射激光照射下產(chǎn)生的局部電磁場增強(qiáng)，使得吸附在金屬基底上的分子拉曼散射強(qiáng)度增強(qiáng)，從而可以指數(shù)級的提高拉曼信號強(qiáng)度（提高10⁶~10⁸倍）。在醫(yī)學(xué)生物學(xué)領(lǐng)域，表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)因?yàn)槠錈o創(chuàng)、快速、簡便、準(zhǔn)確、靈敏度高等特點(diǎn)，成為一種檢測和研究細(xì)胞、組織和體液，了解其組成結(jié)構(gòu)、代謝狀態(tài)、分子變化等的新型技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容