[發明專利]β?咔啉?3?羧酸與寡肽的綴合物，其制備，納米結構和作為抗腫瘤劑的應用

有效

• 申請號: 201310225709.7
• 申請日: 2013-06-05
• 公開（公告）號: CN104211768B
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 趙明;彭師奇;王玉記;吳建輝;楊帥
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K5/09;C07K5/11;A61K47/64;A61K31/437;A61P35/00
• 代理公司: 北京思元知識產權代理事務所(普通合伙)11598
• 代理人: 余光軍

發明領域

本發明涉及圖1結構的β-咔啉-3-羧酸與6種寡肽的綴合物(8a-f)，6種寡肽選自Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro(LPNISKP)，Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)，Arg-Gly-Asp-Phe(RGDF)，Arg-Gly-Asp-Val(RGDV)，Leu-Asp-Val(LDV)和Lys-Glu(KE)。涉及它們的制備方法。涉及它們的納米結構。涉及它們對HL60，HCT-8，HeLa、BEL-7402、HepG2五株腫瘤細胞增殖的抑制作用，進一步涉及它們對荷S180小鼠腫瘤生長的抑制作用。結果表明本發明的β-咔啉-3-羧酸與6種寡肽的綴合物具有優秀的抗腫瘤作用。因而本發明的β-咔啉-3-羧酸與6種寡肽的綴合物作為抗腫瘤藥物具有臨床應用前景。本發明屬于生物醫藥領域。

背景技術

惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的主要疾病之一，攻克癌癥一直是世界矚目的研究課題。世界衛生組織調查表明癌癥患者正在逐年增加，我國癌癥年發病人數在120萬左右，每年死于癌癥的人數高達90萬人以上，已成為僅次于心血管病的第二大疾病。腫瘤的治療方法有手術治療，放射治療和藥物治療(化療)。目前，化療仍然是臨床治療腫瘤的主要手段。由于臨床化療藥物的療效不理想和毒副作用大，所以尋找療效好和毒副作用小的抗腫瘤新藥具有明確的價值。

隨著腫瘤研究深化，最近幾年抗腫瘤藥物不斷從傳統的細胞毒藥物向發展非細胞毒藥物過渡。β-咔啉是天然來源的代表性細胞毒性抗腫瘤化合物。發明人認識到，β-咔啉抗腫瘤的本質是細胞毒性，來自它與腫瘤細胞DNA之間的共價扦插。這種形式的扦插除導致腫瘤細胞增殖受制外，還可造成嚴重毒性反應。發明人曾經發現，β-咔啉與腫瘤細胞DNA之間的扦插包括π-π堆積和共價扦插兩個步驟。在進一步的研究中，發明人認識到，β-咔啉的抗腫瘤活性來自π-π堆積，而嚴重毒性則來自共價扦插。發明人還認識到，在β-咔啉的3位引入羧甲基及衍生基生成β-咔啉-3-羧酸可增強β-咔啉與腫瘤細胞DNA之間的π-π堆積，降低共價扦插。發明人進一步認識到，以N^G-NO₂-Arg為連接臂將β-咔啉-3-羧酸與LPNISKP，RGDS，RGDF，RGDV，LDV和KE六種寡肽綴合，除可進一步增強β-咔啉與腫瘤細胞DNA之間的π-π堆積，避免共價扦插外，還可形成納米結構，促使它在轉運中不被巨噬細胞吞噬。這些種特色使得本發明具有突出的創造性。

發明內容

本發明的第一個內容是提供圖1的以N^G-NO₂-Arg為連接臂的β-咔啉-3-羧酸與LPNISKP，RGDS，RGDF，RGDV，LDV和KE的綴合物(8a-f)。

本發明的第二個內容是提供以N^G-NO₂-Arg為連接臂的β-咔啉-3-羧酸與LPNISKP，RGDS，RGDF，RGDV，LDV和KE的綴合物的制備方法。該方法包括以下步驟：

1)L-色氨酸在稀硫酸催化下與甲醛進行Pictet-Spengler縮合生成3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(1)；

2)3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(1)轉化為3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯(2)；

3)用高錳酸鉀將3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯(2)氧化為β-咔啉-3-羧酸甲酯(3)；

4)β-咔啉-3-羧酸甲酯(3)水解為β-咔啉-3-羧酸(4)；

5)β-咔啉-3-羧酸(4)與硝基精氨酸芐酯偶聯為β-咔啉-3-酰基-N^G-NO₂-Arg-OBzl(5)；

6)β-咔啉-3-酰基-N^G-NO₂-Arg-OBzl(5)水解為β-咔啉-3-酰基-N^G-NO₂-Arg(6)；