[發明專利]阿司匹林?Arg?Gly?Asp?Val綴合物,其合成,納米結構和作為載藥體系的應用

有效

• 申請號: 201310225673.2
• 申請日: 2013-06-05
• 公開（公告）號: CN104211763B
• 公開（公告）日: 2017-11-17
• 發明（設計）人: 彭師奇;趙明;吳建輝;王玉記;馬海萍
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K5/11
• 分類號: C07K5/11;C07K1/06;C07K1/02;A61K47/42;A61K31/616;A61P7/02
• 代理公司: 北京思元知識產權代理事務所(普通合伙)11598
• 代理人: 余光軍

技術領域

本發明涉及一種新型阿司匹林-Arg-Gly-Asp-Val(A-RGDV)綴合物，還涉及它的制備方法以及它作為抗血栓劑的應用。A-RGDV的特征在于，在血液中能夠以納米顆粒選擇性地轉運，到達血栓形成部位之后與被激活的血小板表面的GPIIb/IIIa受體作用，釋放阿司匹林。因此，A-RGDV是阿司匹林的靶向給藥體系。A-RGDV具有強的抗血栓活性，具有良好的臨床應用前景。本發明屬于生物醫藥領域。下面是A-RGDV的結構式。

背景技術

阿司匹林在臨床上被廣泛應用已逾百年，用于治療急性炎癥，疼痛，心血管疾病，中風，妊娠并發癥，癌癥，糖尿病和阿爾茲海默癥，這些表明它卓越的療效。對于不同的適應癥，阿司匹林有不同的治療方案。然而，臨床也已經揭示了阿司匹林的嚴重局限性。最主要的局限性是患者對阿司匹林治療出現耐藥或者喪失療效。患者對阿司匹林治療出現耐藥或者喪失療效，一方面表現在阿司匹林不完全地抑制患者的血小板功能，盡管患者服用了足夠臨床劑量阿司匹林。這種情況嚴重地降低了阿司匹林的對多種疾病包括二型糖尿病，哮喘，心血管疾病，中風，冠心病和小兒心臟手術的治療效果。為了克服阿司匹林的不足，人們做出了許多努力。例如，為增強糖尿病人血小板的敏感性，實施代謝控制和服用阿司匹林的交替給藥方案；為增強高血漿膽固醇的心血管疾病患者的血小板敏感性，將阿司匹林與脂質過氧化抑制劑聯用；為增強動脈粥樣硬化血栓患者血小板的敏感性，將阿司匹林與他汀類藥物聯用；為避免患者對阿司匹林的不良容忍性，將阿司匹林與其它藥物交替使用；為增強因阿司匹林致呼吸道疾病加重的病人口服阿司匹林的安全性，使用采用預處理過的白三烯改造的藥物。盡管這些工作取得了一些成就，患者對阿司匹林治療出現耐藥或者喪失療效至少仍然是限制阿司匹林治療心血管疾病的主要臨床障礙。

RGD序列肽是整合素識別膠原，纖連蛋白，玻連蛋白，層粘連蛋白，免疫球蛋白超家族成員和血漿蛋白質的觸發點。雖然整合素與RGD序列肽的相互作用被廣泛用于制備大分子藥物載體，但是沒有任何研究使用單一的RGD四肽直接輸送藥物。

在RGD四肽與小分子形成的綴合物的生物學研究中，發明人發現，當綴合物的RGD四肽部分與活化的血小板表面的GPIIb/IIIa受體相互作用時，綴合物的小分子部分可以分解下來。也就是說，當RGD四肽與小分子形成的綴合物的RGD四肽部分與血栓中活化的血小板表面的GPIIb/IIIa受體相互作用時，綴合物的小分子部分可以分解下來。而在沒有活化血小板的血液循環中，RGD四肽與小分子形成的綴合物不發生任何分解。根據這些認識，發明人提出了本發明。

發明內容

本發明的第一個內容是將RGDV與阿司匹林綴合，制備新型阿司匹林-Arg-Gly-Asp-Val(A-RGDV)綴合物。下面是該綴合物A-RGDV的結構式。

本發明的第二個內容是提供一種制備A-RGDV的方法，該方法包括：

1)采用液相合成方法，通過逐步接肽分別合成Arg-Gly的保護中間體和Asp-Val的保護中間體；

2)脫去Arg-Gly的保護中間體的C端保護基；

3)脫去Asp-Val的保護中間體的N端保護基；

4)把N端游離的Asp-Val的保護中間體和C端游離的Arg-Gly保護中間體偶聯得到Arg-Gly-Asp-Val的保護中間體；

5)脫去Arg-Gly-Asp-Val的保護中間體的N端保護基；

6)把N端游離的Arg-Gly-Asp-Val保護中間體和阿司匹林偶聯得到A-RGDV的保護中間體；

7)把A-RGDV的保護中間體脫去保護基，得到A-RGDV。

其中，所述的N端保護基是對多肽的N端進行保護時常用的保護基團，例如可以是叔丁氧羰基(Boc)，所述的C端保護基是對多肽的C端進行保護時常用的保護基團，例如 可以是芐氧基(OBzl)。以上所述的液相合成中間體并加以保護的方法是本領域的常規并公知的技術。

本發明的第三個內容是用透射電子顯微鏡(TEM)，掃描電子顯微鏡(SEM)和原子力顯微鏡(AFM)測定A-RGDV的納米結構。通過ROESY2D NMR圖譜，ESl-MS圖譜和介觀理論計算，考察A-RGDV形成納米顆粒的機理。

本發明的第四個內容是研究A-RGDV與GPIIb/IIIa和COX-1的相互作用，說明A-RGDV在血液中保持綴合物分子的完整性，在血栓中釋放阿司匹林，以及顯示的靶向抗血栓作用。

附圖說明