[發明專利]凝結芽孢桿菌作為生物保鮮劑在大黃魚防腐保鮮中的應用

有效

• 申請號: 201310225464.8
• 申請日: 2013-06-07
• 公開（公告）號: CN103300126A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 傅玲琳;王彥波;李剛
• 申請（專利權）人: 浙江工商大學
• 主分類號: A23B4/22
• 分類號: A23B4/22
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 黎雙華

技術領域

本發明屬于水產品防腐保鮮技術，具體涉及凝結芽孢桿菌作為生物保鮮劑在大黃魚防腐保鮮中的應用以及保鮮防腐的方法。

背景技術

隨著人們生活水平的不斷提高，水產品成為人們食品的重要組成部分。水產品含有豐富的蛋白質等營養物質，容易引起腐敗細菌快速生長繁殖，腐敗物質大量積累，因而極易變質，影響到水產品的質量，甚至威脅人的身體健康。鑒于此，水產品的保鮮方法成為目前的研究熱點。

目前水產品保鮮一般采用低溫冷藏或者化學防腐保鮮，然而低溫冷藏會顯著影響水產品本身的風味特性，降低其營養價值。化學防腐保鮮雖然能夠有效的延長水產品的貨架期，但是部分化學物質不但影響水產品的品質，而且長期過量攝入會對人體健康造成一定的損害。

凝結芽孢桿菌作為一種產芽孢乳酸菌，是一類分離自大黃魚的益生菌。研究表明該菌是一類對宿主有益的細菌，也列入了美國FDA公布的安全的微生物菌種名單。凝結芽孢桿菌具有較好的益生菌特性，能夠有效的抑制水產品中致病菌和腐敗菌的生長。同時，該菌還可使水產品盡可能保持其原有的鮮度和風味，實現較長時間的保存。

發明內容

本發明的目的在于提供一種凝結芽孢桿菌作為生物保鮮劑在水產品保鮮防腐中的應用，為水產品特別是大黃魚的防腐保鮮提供新的途徑。

凝結芽孢桿菌作為生物保鮮劑在大黃魚防腐保鮮中的應用，所述凝結芽孢桿菌的保藏編號為CCTCC?NO：M?2013193。

保藏編號為CCTCC：C201351的菌株分類命名為凝結芽孢桿菌LL1103（Bacillus?coagulans?LL1103），保藏日期為2013年5月9日，保藏單位是中國典型培養物保藏中心，保藏地址是中國武漢武漢大學。

所述凝結芽孢桿菌菌株在營養瓊脂平板上的菌落直徑為2.0-2.5mm，平臺狀，邊緣整齊，不透明，有光澤，無色素，質地較軟；顯微鏡下該菌株細胞呈直桿狀，細胞大小在0.5×1.0μm-1.5×4.0μm，具有圓端，芽孢橢圓端生；在液體培養基中呈均勻混濁并伴有微量沉淀，輕輕搖動沉淀即散開。

本發明的另一個目的在于提供一種大黃魚防腐保鮮方法，其特征在于，用碎冰將鮮活大黃魚失活，去頭、尾、魚鱗、內臟等不可食部分，洗凈后將魚切成厚度為0.5-2cm的魚片，沖洗干凈后浸泡于所述凝結芽孢桿菌的菌懸液中3-5min，瀝干，于4℃冰箱貯藏。

所述菌懸液可通過以下步驟得到：

（1）首先從營養瓊脂斜面培養基上挑取已活化的凝結芽孢桿菌，接種于營養肉湯種子培養基中，30-45℃搖床培養12h，在將種子液按6%的接種量接種于營養肉湯培養基中，30-45℃靜置培養24h得到發酵液；所述凝結芽孢桿菌的保藏編號為CCTCC?NO：M?2013193；

（2）將步驟1得到的發酵液在4℃，8000rpm/min離心15min；得到的菌泥用0.65%生理鹽水重懸，菌懸液的濃度為1×10⁴到1×10⁵CFU/mL。

經過大量實驗證明，使用本發明的方法對大黃魚進行保鮮，儲藏16天后，揮發性鹽基氮（TVB-N）等指標均符合我國鮮大黃魚等相關衛生標準（SC/T?3101-2010）中合格品，防腐保鮮效果顯著，延長了大黃魚的貨架期。結果表明凝結芽孢桿菌能夠有效地抑制大黃魚表面細菌的生長，同時對大黃魚魚肉的脂肪酸氧化和新鮮度也有一定的改善效果。

本發明的有益效果如下：

1、凝結芽孢桿菌作為一種益生菌，其添加對人體安全無害，而且其產生的某些成分對人體具有保健作用。

2、該凝結芽孢桿菌的抑菌譜較廣，能夠有效的抑制革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌的生長，且在4℃條件下保藏也具有顯著的作用，從而對大黃魚的防腐保鮮起到很好的效果。

3、該凝結芽孢桿菌在對大黃魚等水產品保鮮的過程中能夠有效保持水產品的新鮮度、感官性狀等。

具體實施方式

本發明以pH值，揮發性鹽基氮（TVB-N），硫代巴比妥酸（TBA），K值，菌落總數等指標評價凝結芽孢桿菌對養殖大黃魚保鮮效果。

揮發性鹽基氮（TVB-N）的測定方法：稱取10g絞碎的樣品到750ml的蒸餾管中，再加入50ml蒸餾水到蒸餾管中，攪拌均勻。然后加入1g氧化鎂和2滴消泡劑，并連接到蒸餾器上。儀器設定程序為：1%硼酸接收液30ml，蒸餾時間為5min，用0.1moL/ml鹽酸標準滴定液。TVB-N值單位為mgN/100g。