[發(fā)明專利]長柱十大功勞總生物堿的制備及其質(zhì)量控制方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310223271.9
• 申請日: 2013-06-06
• 公開（公告）號: CN103301177A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉布鳴;邱宏聰;何開家;黃艷;孫翠;林霄;高微
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院
• 主分類號: A61K36/29
• 分類號: A61K36/29;A61P29/00;A61P1/12;A61P1/16;G01N30/90;G01N30/88
• 代理公司: 廣西南寧明智專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 45106
• 代理人: 馮菁

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及總生物堿提取物制備領(lǐng)域，具體是一種長柱十大功勞總生物堿的制備及其質(zhì)量控制方法。

背景技術(shù)

長柱十大功勞（Mahonia?duclouxiana?Gagnep.）是小檗科Berberidaceae十大功勞屬Mahonia植物的一個品種，資源十分豐富，其性味苦寒，入肝、胃、大腸經(jīng)，具有清熱解毒化痰利濕的效用，主治肺結(jié)核、潮熱、咳嗽、咯血、腰膝無力、頭暈耳鳴、失眠；腸類腹瀉、黃膽型肝炎、目赤腫痛?，F(xiàn)代科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，十大功勞屬植物中富含原小檗堿類活性成分，何開家等從十大功勞中已分離得到5個化合物，分別鑒定為鹽酸藥根堿﹑鹽酸巴馬汀﹑鹽酸小檗堿﹑異粉防己堿和β-谷甾醇（【題名】長柱十大功勞化學(xué)成分研究【作者】何開家，劉布鳴，盧文杰,廣西中醫(yī)藥研究院【刊名】華西藥學(xué)雜志，2008,23(2):72-174），并經(jīng)化學(xué)鑒別與薄層色譜鑒別，證明其生物堿成分主要有鹽酸藥根堿﹑鹽酸巴馬汀﹑鹽酸小檗堿（【題名】長柱十大功勞的鑒別【作者】劉偲翔，何開家，蔡全玲，等，廣西中醫(yī)藥研究院【刊名】廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008,11(1):48-49）。

長柱十大功勞在廣西資源豐富，然而，由于長期以來關(guān)于長柱十大功勞的研究較少，目前對長柱十大功勞的開發(fā)利用相對滯后，主要是直接用原藥材制備湯劑服用，這種傳統(tǒng)用藥方法有服用不方便、療效不穩(wěn)定、質(zhì)量無法控制等缺點。隨著藥品科技的發(fā)展，精制的天然植物提取物低毒高效的特性受到人們越來越多的青睞，現(xiàn)代科學(xué)研究亦發(fā)現(xiàn)長柱十大功勞提取物具有抗炎、鎮(zhèn)痛、止瀉、保護黃疸型肝炎等藥理作用，因此研發(fā)一種長柱十大功勞總生物堿提取物的制備及其質(zhì)量控制方法是有必要的，利于開發(fā)長柱十大功勞新的藥用途徑，并為藥材資源的充分利用及提高其應(yīng)用價值提供科學(xué)的依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于，提供一種具有抗炎、鎮(zhèn)痛、止瀉、保護黃疸型肝炎等藥理作用的長柱十大功勞總生物堿的制備方法，以及長柱十大功勞總生物堿的質(zhì)量控制方法。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

本發(fā)明長柱十大功勞總生物堿的制備方法，包括以下步驟：

1、乙醇-鹽酸加熱回流提?。?/p>

①?取長柱十大功勞干燥莖干的粗粉，按重量配比加5-15倍量50%-90%體積濃度的乙醇-鹽酸（100：0.5）；?

②?在溫度為60-90?℃下回流提取1-4次，每次0.5-2.5小時，濾過，合并濾液；

③?濾液回收乙醇，并濃縮至無乙醇味，加水稀釋得到濃度為0.1-0.2?g生藥量/mL的長柱十大功勞提取液，待上柱用。

2、大孔吸附樹脂法分離純化：

①?選擇弱極性的AB－8或D101大孔吸附樹脂；

②?吸附：上柱長柱十大功勞提取液濃度為0.1-?0.2?g生藥量/mL，上柱長柱十大功勞提取液體積為填充大孔吸附樹脂體積的5-10倍，上樣流速1-3?BV/h【注：BV/h表示柱內(nèi)單位時間（h）流經(jīng)單位體積樹脂平均液量】；

③?洗脫：用10-50%乙醇為洗脫劑；洗脫劑用量為5-10?BV；洗脫流速為1-3?BV/h;?收集5-10倍洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮至干，50-80?℃真空干燥，即可得到長柱十大功勞總生物堿提取物。

本發(fā)明長柱十大功勞總生物堿的質(zhì)量控制方法，包括以下步驟：

1、總生物堿的薄層色譜鑒別：

取長柱十大功勞提取物粉末10?mg，置10?ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取長柱十大功勞藥材粉末1?g，加甲醇15?ml，超聲處理（功率160W，頻率40kHz）15分鐘，濾過，作為對照藥材溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，鹽酸藥根堿對照品，鹽酸巴馬汀對照品，加甲醇制成每1?ml含0.5?mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2?μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液（體積比：6:3:1.5:1.5:0.5）為展開劑，置氨蒸汽飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外燈（365?nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材，對照品相同的位置，顯相同顏色的斑點。

2、總生物堿的含量測定（一測多評測定法）

①?色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：?以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05?mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（體積比：3:7）（磷酸調(diào)pH值至3.0），為流動相；檢測波長為265?nm。