[發明專利]一種以TRPV3通道蛋白為靶點的用于治療皮膚瘙癢藥物的篩選方法

有效

• 申請號: 201310218441.4
• 申請日: 2013-06-04
• 公開（公告）號: CN103349786A
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 楊勇;林志淼;曹旭;張潔
• 申請（專利權）人: 北京大學第一醫院
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;G01N21/64;G01N27/60
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所 11308
• 代理人: 秦力軍;何志原

技術領域

本發明涉及一種藥物篩選方法，特別是涉及一種用于治療皮膚瘙癢藥物的篩選方法。

背景技術

瘙癢是一種機體應對有害刺激的防御機制，會導致搔抓行為。它既是皮膚病最常見的癥狀，也可見于系統性疾病，常常影響患者的生活質量。根據對瘙癢中樞和外周發生機制的研究，將其分為五類：1）皮膚源性瘙癢：起源于皮膚，由于炎癥、干燥及其他皮膚操作引起，由C類神經纖維傳導，如疥瘡、蕁麻疹等；2）神經病性瘙癢：由于感覺神經傳入通路中發生病理改變而引起的瘙癢，如皰疹后遺神經痛伴隨的瘙癢；3）神經源性瘙癢：起源于中樞，但無神經病學依據，如由阿片樣肽作用于μ-阿片肽受體引起的膽汁淤積性瘙癢；4）心源性瘙癢：由心理異常所引發的瘙癢，如寄生蟲恐怖癥的妄想狀態；5）混合性瘙癢：由兩種或兩種以上機制引起，如特應性皮炎，其既有皮膚源性瘙癢又有神經源性瘙癢。

神經生理學研究表明，癢覺感受器存在于真皮與表皮連接處的感覺神經游離末梢，這些感受器可以特異性結合致癢物質（瘙癢的傳導介質），如胺類、蛋白酶、生長因子、神經肽、類阿片物質、二十烷類、細胞素等。這些物質表達于不同的皮膚細胞中，如角質細胞、上皮細胞、內皮細胞，不同的癢覺感受器與來源不同的配體特異性結合后，傳遞沖動導致瘙癢。

瞬時感受器電位離子通道蛋白（transient?receptor?potential?ion?channel?protein，TRPs）是一類在外周和中樞神經系統分布很廣泛的陽離子通道蛋白，TRP家族主要由七個亞族組成：TRPC、TRPV、TRPM、TRPML、TRPP、TRPA和TRPN。TRP受到多種因素的調節，包括滲透壓、pH值、機械力以及一些內、外源性配體和細胞內信號分子，其參與生物體內感覺信息傳遞如視覺、溫度覺、痛覺和觸覺等，并且具有調節胞內Ca²⁺平衡等多種重要的生理功能。TRP家族與其它離子通道家族的顯著區別在于家族各成員之間的同源性較低，并且可被多種介質和配體激活或敏化。

TRPV即瞬時感受器電位香草酸受體亞型通道，是TRP通道家族中的一類亞型，共包括1-6六個亞型，其中TRPV1、TRPV2、TRPV3和TRPV4被稱為“溫度敏感”（thermosensitive）通道，V代表vanilloid(辣椒素類物質)，以紀念該家族第一個成員TRPV1被vanilloid類化學物質特別是辣椒素(capsaicin)所激活，所以TRPV1又被成為辣椒素受體。TRPV通道有和經典的電壓依賴鉀通道相同的拓撲結構，包含6個疏水跨膜區域，1個胞內ANK區及1個C端區，跨膜區域可以形成同源性或者異源性四聚體，組成一個疏水孔道，開放時陽離子經該孔道進入細胞內。自1997年Caterina等在背根神經節（DRG）成功克隆了TRPV1受體后，TRPV2、TRPV3、TRPV4以及TRPM8和TRPA1也相繼被發現存在于背根神經節中。這些離子通道被認為參與了化學物質、溫度以及機械刺激所誘導的痛覺的形成。

溫度敏感的TRPV家族成員廣泛分布于神經與非神經組織中，其中TRPV3通道主要表達在皮膚組織中，其可被31℃～38℃范圍的無害溫度、炎癥介質、一氧化氮（NO）及外源性化學物質如植物源性皮膚致敏劑（如丁香酚、麝香草酚和香芹酚等）、樟腦和2-APB激活或敏化，TRPV3通道被打開后，以胞外陽離子向胞內流動的形式激活下游通路。研究表明，G蛋白偶聯受體（GPCR）通過磷脂酶C、花生四烯酸或不飽和脂肪酸等途徑均可提高TRPV3的活性，并且認為TRPV3是炎癥病理過程中的痛覺增敏的介導者，其主要機制可能為：1）在人背根神經節中與TRPV1共存且形成異聚體從而感知各種傷害性刺激；2）感覺神經上受體炎癥介質激活后通過PLC和PKC途徑激活或敏化TRPV3；3）感覺神經產生的NO作為第二信使直接激活TRPV3；4）炎癥過程中產生的花生四烯酸或其他脂肪酸來提高TRPV3的功能。