[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)β-D-葡萄糖苷酶的工程菌及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310217251.0
• 申請(qǐng)日: 2013-06-03
• 公開（公告）號(hào): CN104212754A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊東輝;陶逸倫;劉樹林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/21
• 分類號(hào): C12N1/21;C12N9/42;C12N15/56;C12P19/14;C12R1/19
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.將編碼SDGBGL蛋白的基因?qū)氪竽c桿菌得到的重組菌；所述SDGBGL蛋白為如下（a）或（b）或（c）：

（a）序列表的序列1自N末端第20-775位氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)；

（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

（c）將（a）或（b）經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-葡萄糖苷酶活性的由（a）或（b）衍生的蛋白質(zhì)。

2.如權(quán)利要求1所述的重組菌，其特征在于：所述編碼SDGBGL蛋白的基因?yàn)槿缦拢?）或（2）或（3）或（4）所述的DNA分子：

（1）序列表的序列2自5’末端第58-2328位核苷酸所示的DNA分子；

（2）序列表中序列2所示的DNA分子；

（3）在嚴(yán)格條件下與（1）或（2）限定的DNA序列雜交且編碼具有β-葡萄糖苷酶活性的蛋白的DNA分子；

（4）與（1）或（2）限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且編碼具有β-葡萄糖苷酶活性的蛋白的DNA分子。

3.如權(quán)利要求1或2所述的重組菌，其特征在于：所述編碼SDGBGL蛋白的基因通過(guò)重組表達(dá)載體導(dǎo)入所述大腸桿菌。

4.如權(quán)利要求3所述的重組菌，其特征在于：所述重組表達(dá)載體為將所述編碼SDGBGL蛋白的基因?qū)雙EASY-E1載體得到的重組質(zhì)粒。

5.如權(quán)利要求1至4中任一所述的重組菌，其特征在于：所述大腸桿菌為大腸桿菌Rosetta(DE3)。

6.如權(quán)利要求1所述的重組菌，其特征在于：所述重組菌的保藏編號(hào)為CGMCC?No.7630。

7.權(quán)利要求1至6中任一所述的重組菌在制備β-葡萄糖苷酶中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求1至6中任一所述的重組菌的發(fā)酵上清。

9.權(quán)利要求8所述發(fā)酵上清在制備β-葡萄糖苷酶中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求8所述發(fā)酵上清在水解糖苷中的應(yīng)用。