[發明專利]一種鼻咽癌放療敏感性多肽標志物SPG04及其ELISA試劑盒

有效

• 申請號: 201310210532.3
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN103333226A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 魏開華;夏云飛;侯利平;陶亞嵐;傅海媛;楊保安;黃亞娟;宋純艷;鄭俊杰;甄蓓;張拓;韓志國
• 申請（專利權）人: 北京正旦國際科技有限責任公司;中山大學腫瘤防治中心
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K16/18;G01N33/68;G01N33/574;G01N33/543
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

1.一種鼻咽癌放療敏感性多肽標志物SPG04，其全長氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示。

2.一種以權利要求1所述多肽標志物SPG04為抗原、與該多肽發生特異性結合的抗體。

3.根據權利要求2所述的抗體，其特征在于，所述抗體為多克隆抗體，其按照如下步驟制備：

1）采用固相合成法制備合成肽SPG04；

2）采用碳二亞胺偶聯法將合成肽SPG04與載體蛋白牛血清白蛋白偶聯制備免疫原SPG04-BSA；

3）將免疫原SPG04-BSA進行動物免疫，獲得免疫血清，通過純化，獲得濃度2.7mg/mL、滴度1:128000的抗合成肽SPG04多克隆抗體。

4.一種ELISA試劑盒，其特征在于，包括權利要求2或3所述的抗體。

5.根據權利要求4所述的ELISA試劑盒，其特征在于，進一步包括包被液、2%OVA、HRP酶標二抗、TMB顯色液、2M硫酸和96孔酶聯板中的一種或多種。

6.根據權利要求5的試劑盒，其特征在于，所述抗體為兔源多克隆抗體，所述HRP酶標二抗為HRP-羊抗兔。

7.權利要求1所述的多肽標志物SPG04、權利要求2或3所述的抗體在制備用于檢測鼻咽癌放療敏感性試劑中的應用。

8.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，利用權利要求2或3所述抗體制備ELISA試劑盒。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述ELISA試劑盒進一步包括包被液、2%OVA、HRP酶標二抗、TMB顯色液、2M硫酸和96孔酶聯板中的一種或多種。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，具體方法按照如下步驟操作：在96孔酶聯板中，將檢測血清與包被液包被過夜，清洗，用20%OVA溶液封閉，清洗，加入抗合成肽SPG04多克隆抗體，適宜溫度孵育后，清洗，加入HRP酶標二抗，清洗，用TMB顯色液顯色，再用2M硫酸終止，450nm檢測OD值。