[發明專利]蛹蟲草蛋白質提取物及其抗腫瘤的應用

有效

• 申請號: 201310208543.8
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN103272213A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 趙爽;劉宇;許峰;陳杰;楊娟娟;王守現;耿小麗;王蘭青;尹昭坤
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: A61K38/00
• 分類號: A61K38/00;A61K36/068;A61P35/00;C07K1/30;C07K1/36;C07K1/34;C07K2/00;A23L1/305
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及蛹蟲草蛋白質提取物及其抗腫瘤的應用。

背景技術

蛹蟲草(Cordyceps?militaris)，隸屬于子囊菌門、核菌綱、麥角菌目、麥角菌科、蟲草屬的子囊真菌，是一種珍貴的藥用真菌。蛹蟲草化學成分和藥理作用與冬蟲夏草相似，在臨床上常替代冬蟲夏草入藥。蛹蟲草具有殺菌、消炎、增強免疫力等功效，不僅能食用，而且還可制成保健品和藥品。人工栽培蛹蟲草時，往往遇到出草率下降的情況，王賀祥等著重講述了野生蛹蟲草菌株的分離和高產菌株的篩選的方法，以提高人工栽培的商業效率。林金盛等總結了蛹蟲草藥用機理，并提出了解決蛹蟲草產業化栽培瓶頸的幾項對策?，F代科學論證，蛹蟲草中含有多種有效成分，不僅具有特殊的營養價值，而且有明顯的藥用價值，其中尤以蟲草素、蟲草多糖等多種生物活性物質的藥用價值最為顯著。祁波等建立了從蛹蟲草中綜合提取蟲草素和蟲草多糖的最佳工藝。采用正交試驗對蛹蟲草中蟲草素和蟲草多糖綜合提取工藝進行了研究，為進一步開發利用提供有價值的參考數據。姜明蘭等用苯酚-硫酸法分別測定了野生和人工栽培的蛹蟲草中多糖的含量。結果顯示，兩種蛹蟲草的多糖含量都很高，野生蛹蟲草的多糖含量比人工栽培的蛹蟲草高許多。江曉路等分別用薄層層析法和高碘酸氧化法測定了蛹蟲草、冬蟲夏草及其發酵菌絲中腺昔和甘露醇的含量。蟲草多糖被醫學界認為是非常好的免疫促進劑之一，可增強機體免疫力。目前的研究進展還未發現從蛹蟲草子實體中提取蛋白類物質直接殺傷腫瘤細胞的報道。

發明內容

本發明所要解決的一個技術問題是提供具有抗腫瘤活性的蛹蟲草蛋白質提取物。

本發明所提供的蛹蟲草蛋白質提取物，按照包括如下步驟的方法制備：

1）將蛹蟲草子實體粉碎后用水浸提，收集水溶性物質得到蛹蟲草水溶性提取物；

2）對所述蛹蟲草水溶性提取物進行飽和度為80%的硫酸銨沉淀，收集沉淀，對所述沉淀用去離子水透析后，得到所述蛹蟲草蛋白質提取物。

上述步驟1）中，所述用水浸提可為在2-6℃用水浸提10-14小時。所述水可為去離子水。

所述蛹蟲草子實體可為新鮮的子實體也可為干燥的子實體。所述干燥的子實體是將新鮮的蛹蟲草子實體在常溫（如20-25℃）下干燥得到的。

所述新鮮蛹蟲草子實體和水的體積比可為1：4-6，如1：4。

上述步驟1）中，可采用離心收集所述水溶性物質。離心收集所述水溶性物質的離心力可為6000-15000g（如12000g），離心時間可為10-20分鐘（如15分鐘）。上述步驟2）中，也可采用離心收集所述沉淀。離心收集所述沉淀的離心力可為6000-15000g（如12000g），離心時間可為10-20分鐘（如15分鐘）。

上述步驟2）中，在4℃對所述蛹蟲草水溶性提取物進行飽和度為80%的硫酸銨沉淀。

上述步驟2）中，所述用去離子水透析采用截留分子量為3kDa半透膜進行。

上述制備方法還包括將透析后的半透膜內的液體在3000-9000g（如6000g），離心10-20分鐘（如15分鐘），收集上清液，將該上清液進行冷凍干燥，制備成蛹蟲草蛋白質提取物干粉的步驟。

本發明所要解決的另一個技術問題是提供上述蛹蟲草蛋白質提取物的用途。

本發明所提供的上述蛹蟲草蛋白質提取物的用途，為下述A或B：

A、抗腫瘤或腫瘤細胞的產品（如藥物、保健品和/或食品），其活性成分為上述蛹蟲草蛋白質提取物；

B、上述蛹蟲草蛋白質提取物在制備抗腫瘤或腫瘤細胞的產品（如藥物、保健品和/或食品）中的應用。

上述用途中，所述腫瘤可為實體腫瘤。

所述實體腫瘤可為肝癌、乳腺癌和/或肺癌；所述腫瘤細胞可為肝癌細胞、乳腺癌細胞和/或肺癌細胞。所述肺癌可為肺腺癌，所述肺癌細胞可為肺腺癌細胞。

所述肝癌細胞可為人肝癌細胞，如HepG2細胞；所述乳腺癌細胞可為人乳腺癌細胞，如MCF-7細胞；所述肺癌細胞可為人肺腺癌細胞，如A-549細胞。

上文中，所述蛹蟲草具體可為蛹蟲草（Cordyceps?militaris）（安徽）CFCC89535。