[發明專利]黃傘蛋白質提取物及其抗腫瘤的應用

有效

• 申請號: 201310208448.8
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN103285045A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 趙爽;王守現;劉宇;許峰;耿小麗;王蘭青
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: A61K36/07
• 分類號: A61K36/07;A61K38/00;A23L1/28;A23L1/305;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及黃傘蛋白質提取物及其抗腫瘤的應用。

背景技術

黃傘，又稱多脂鱗傘（Pholiota?adipose）、柳蘑、黃蘑、黃柳菇等，屬于擔子菌門，層菌綱，傘菌目，球蓋菇科，鱗傘屬。黃傘營養豐富，在提高免疫功能等方面具有顯著效果，是目前具開發潛力的食藥用真菌。

目前對黃傘的研究工作主要包括黃傘栽培條件的優化，黃傘的營養價值等方面。歐秀元等采用平板培養和液體培養的方法研究不同碳源及其濃度對黃傘菌絲生長和胞外多糖產量的影響，確定了適宜黃傘菌平板培養菌絲的碳源及其濃度。蘇元英探討了黃傘深層培養的適宜條件。在有關黃傘營養價值的研究中，蔡德華測定了黃傘菌絲粗蛋白含量和氨基酸組成，對其蛋白質的營養價值進行全面評價，結果顯示，黃傘菌絲的必需氨基酸含量最高，評價蛋白質氨基酸、必需氨基酸指數、生物價、營養指數和氨基酸比值系數等指標中發現黃傘與白靈側耳、刺芹側耳和金頂側耳比較，各項指標相對較高，具有很高的營養價值。王萍探討了黃傘子實體多糖的純化方法及對高脂血癥小鼠降血脂作用。研究表明，黃傘子實體多糖能顯著降低TC，TG，LDL-C水平，提高HDL-C水平和動脈粥樣硬化因子(AI)，具有降低小鼠高血脂癥、預防動脈粥樣硬化的作用。從黃傘子實體中提取蛋白類物質進行體外抗腫瘤的研究尚屬空白。

發明內容

本發明所要解決的一個技術問題是提供具有抗腫瘤活性的黃傘蛋白質提取物。

本發明所提供的黃傘蛋白質提取物，按照包括如下步驟的方法制備：

1）將黃傘子實體粉碎后用水浸提，收集水溶性物質得到黃傘水溶性提取物；

2）對所述黃傘水溶性提取物進行飽和度為80%的硫酸銨沉淀，收集沉淀，對所述沉淀用去離子水透析后，得到所述黃傘蛋白質提取物。

上述步驟1）中，所述用水浸提可為在2-6℃用水浸提10-14小時。所述水可為去離子水。

所述黃傘子實體可為新鮮的子實體也可為干燥的子實體。所述干燥的子實體是將新鮮的黃傘子實體在常溫（如20-25℃）下干燥得到的。

所述新鮮黃傘子實體和水的體積比可為1：4-6，如1：4。

上述步驟1）中，可采用離心收集所述水溶性物質。離心收集所述水溶性物質的離心力可為6000-15000g（如12000g），離心時間可為10-20分鐘（如15分鐘）。上述步驟2）中，也可采用離心收集所述沉淀。離心收集所述沉淀的離心力可為6000-15000g（如12000g），離心時間可為10-20分鐘（如15分鐘）。

上述步驟2）中，在4℃對所述黃傘水溶性提取物進行飽和度為80%的硫酸銨沉淀。

上述步驟2）中，所述用去離子水透析采用截留分子量為3kDa半透膜進行。

上述制備方法還包括將透析后的半透膜內的液體在3000-9000g（如6000g），離心10-20分鐘（如15分鐘），收集上清液，將該上清液進行冷凍干燥，制備成黃傘蛋白質提取物干粉的步驟。

本發明所要解決的另一個技術問題是提供上述黃傘蛋白質提取物的用途。

本發明所提供的上述黃傘蛋白質提取物的用途，為下述A或B：

A、抗腫瘤或腫瘤細胞的產品（如藥物、保健品和/或食品），其活性成分為上述黃傘蛋白質提取物；

B、上述黃傘蛋白質提取物在制備抗腫瘤或腫瘤細胞的產品（如藥物、保健品和/或食品）中的應用。

上述用途中，所述腫瘤可為實體腫瘤。

所述實體腫瘤可為肝癌、乳腺癌和/或肺癌；所述腫瘤細胞可為肝癌細胞、乳腺癌細胞和/或肺癌細胞。所述肺癌可為肺腺癌，所述肺癌細胞可為肺腺癌細胞。

所述肝癌細胞可為人肝癌細胞，如HepG2細胞；所述乳腺癌細胞可為人乳腺癌細胞，如MCF-7細胞；所述肺癌細胞可為人肺腺癌細胞，如A-549細胞。

上文中，所述黃傘具體可為黃傘（Pholiota?adipose）HS5CGMCC?No.6063，該菌株于2012年04月26日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC),已于2012年9月19日公布在公布號為CN?102668885?A的中國發明專利申請中。