[發明專利]一種大腸桿菌工程菌株及其好氧-微好氧-厭氧全階段發酵生產琥珀酸的應用

有效

• 申請號: 201310203945.9
• 申請日: 2013-05-28
• 公開（公告）號: CN103243064A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發明（設計）人: 祁慶生;梁泉峰;李宜奎
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P7/46;C12R1/19
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李健康

1.一種大腸桿菌工程菌株，其特征在于：所述菌株名為埃希氏大腸桿菌(Escherichia?coli)YL106,菌株的基因型為MG1655ΔptsGΔpoxBΔptaΔiclRΔsdhAΔarcAΔldhAΔadhE?pckA*glf_ZM，該菌已于2013年4月17日保藏在“中國典型培養物保藏中心”，保藏編號為CCTCC?NO:M2013149。

2.權利要求1所述大腸桿菌工程菌株在好氧-微好氧-厭氧全階段發酵生產琥珀酸的應用，其特征在于，所述好氧階段條件是發酵溫度為37℃、攪拌轉速為500轉/分、pH6.5-7.0、溶氧在20%以上、培養時間為10h-14h；微好氧階段條件是發酵溫度為37℃、攪拌轉速為500轉/分、pH6.5-7.0、溶氧在5%～10%之間、培養時間為16h-36h；厭氧階段條件為發酵溫度為37℃、攪拌轉速為500轉/分、pH6.5-7.0、停止對發酵液通氣、培養時間為10h-20h；在整個發酵過程中，初始葡萄糖濃度為40g/L，當其濃度降低到10g/L時，補充其濃度至20g/L，并用5M?K₂CO₃和10M?KOH維持pH在6.5-7.0；其中上述發酵培養基組成為：(NH₄)₂HPO₄·12H₂O，2.63g/L；NH₄H₂PO₄，0.87g/L；KCl，0.15g/L；MgSO₄·7H₂O，0.37g/L；微量元素（1000×：FeCl₃·6H₂O，2.4g/L；CoCl₂·6H₂O，0.3g/L；CuCl₂·2H₂O，0.15g/L；ZnCl₂，0.3g/L；Na₂MoO₄·H₂O，0.3g/L；H₃BO₃，0.075g/L；MnCl₂·4H₂O，0.5g/L；HCl，120mM）；蛋白胨，20g/L；酵母粉，10g/L；余量為水。