[發(fā)明專利]一種快捷高通量的體外DNA序列修改方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310202937.2 | 申請日： | 2013-05-28 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN103275969A | 公開（公告）日： | 2013-09-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李陽;李陽生;盧楠;李楊 | 申請（專利權(quán)）人： | 武漢大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N15/10 | 分類號(hào)： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 武漢科皓知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 薛玲 |
| 地址： | 430072 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 快捷 通量 體外 dna 序列 修改 方法 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種體外DNA序列修改方法，該方法通過設(shè)計(jì)合成針對修改位置的突變引物，該突變引物的一端具有識(shí)別位點(diǎn)和酶切位點(diǎn)不重合的限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列，用待修改的目標(biāo)DNA做模板，PCR擴(kuò)增并酶切，連接。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外DNA序列修改方法，其特征在于，針對目標(biāo)DNA不同的待修改位置，設(shè)計(jì)合成多個(gè)針對不同修改位置的突變引物，這些突變引物的一端具有typeIIS酶識(shí)別序列，用待修改的目標(biāo)DNA做模板，先進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后通過酶切—連接，將突變點(diǎn)引入。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的體外DNA序列修改方法，其特征在于，所述突變引物包括：保護(hù)堿基、酶切識(shí)別位點(diǎn)、酶切位點(diǎn)、模板識(shí)別序列、DNA編輯位點(diǎn)，DNA編輯位點(diǎn)位于粘末端內(nèi)或者模板識(shí)別序列與粘末端之間。
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