[發(fā)明專利]一株辛酰溴苯腈降解假單胞菌MXB-03及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310200775.9
• 申請日: 2013-05-27
• 公開（公告）號: CN103243058A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 顧喬梅;張金;張永樂;蔡雙梅
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇南資環(huán)保科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A62D3/02;C12R1/38;A62D101/04;A62D101/28
• 代理公司: 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 32206
• 代理人: 顧進(jìn)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物高技術(shù)領(lǐng)域，是利用微生物的方法降解化學(xué)農(nóng)藥，適用于現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中綠色無公害農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)與加工，具體涉及一株辛酰溴苯腈降解假單胞菌MXB-03及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著人們生活水平的提高和環(huán)境保護(hù)意識的增強(qiáng)，全社會對農(nóng)藥殘留帶來的直接危害和潛在影響亦愈來愈關(guān)注，人們迫切需要無農(nóng)藥殘留污染的清潔的綠色農(nóng)產(chǎn)品。但從目前我國的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)形式和人口狀況來看，以停止農(nóng)藥使用降低農(nóng)業(yè)產(chǎn)量為代價的無公害生產(chǎn)模式是行不通的，農(nóng)藥作為控制病蟲害的有效手段還將繼續(xù)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮巨大的作用。如何能解決農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的這個兩難問題就成為各個學(xué)科的研究熱點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)室和實(shí)際應(yīng)用研究都表明利用微生物來降解消除土壤中的農(nóng)藥殘留“庫”容量，從而降低糧食、蔬菜、茶葉等農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留，提高農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)和經(jīng)濟(jì)價值是可行的。

辛酰溴苯腈是法國羅納普朗克公司首先開發(fā)的觸殺型旱田除草劑，30%辛酰溴苯腈乳油在我國已獲臨時登記。辛酰溴苯腈已經(jīng)在我國廣泛應(yīng)用于小麥和玉米田中防除雜草，可有效防除小麥、大麥、玉米、高粱、甘蔗、薺菜等闊葉雜草和水稻田里的疣草等，在歐州和澳大利亞已成為大噸位使用的除草劑。目前國內(nèi)有關(guān)辛酰溴苯腈的合成方法是先制備溴苯腈，再以辛酰氯酯化或辛酸酯化得到辛酰溴苯腈，其中，溴苯腈的制備是辛酰溴苯腈產(chǎn)品的合成關(guān)鍵。辛酰溴苯腈為選擇性苗后莖葉處理觸殺型除草劑，主要由葉片吸收，在植物體內(nèi)進(jìn)行極有限的傳導(dǎo)，通過抑制光合作用的各個過程，使植物組織迅速壞死，從而達(dá)到殺草目的，氣溫較高時加速葉片枯死，在殺死雜草的同時，也對作物造成很大的傷害。辛酰溴苯腈能導(dǎo)致嚙齒類動物的生殖障礙，一旦進(jìn)入水體，會產(chǎn)生很強(qiáng)的毒性，對魚類的生存構(gòu)成威脅

目前，國內(nèi)外有關(guān)辛酰溴苯腈在環(huán)境中降解動態(tài)方面的研究不多，而生物修復(fù)技術(shù)因微生物本身能對各類不同的有機(jī)污染物進(jìn)行降解和轉(zhuǎn)化而具有巨大的潛力。因此，從自然環(huán)境中篩選得到能夠去除辛酰溴苯腈的有效菌種具有重大的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對生產(chǎn)實(shí)踐中的實(shí)際問題和需求，開發(fā)研制出一種新型的農(nóng)藥殘留降解菌劑，使用本菌劑可以使辛酰溴苯腈的殘留量降低90％以上。具有較廣的降解譜，生產(chǎn)和使用成本較低。使用該降解菌劑可以在農(nóng)作物的正常生長過程中正常使用化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行病蟲害防治而保證農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留含量符合綠色食品要求。

本發(fā)明提供一種消除辛酰溴苯腈殘留的降解菌，其菌株MXB-03是一株革蘭氏染色反應(yīng)陰性菌，于2013年4月9日保藏于中國微生物菌種保存管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100101），保藏編號CGMCC?NO.7436，經(jīng)鑒定是假單胞菌屬(Pseudomonas?sp.)。主要生物學(xué)特性為G^-，在LB固體培養(yǎng)基上菌落呈圓形，直徑2mm左右，淺黃色，表面突起，光滑，邊緣，經(jīng)結(jié)晶紫染色后在顯微鏡下菌為短桿狀，無芽孢，極生鞭毛；接觸酶陽性；氧化酶陰性；不能水解淀粉，不能液化明膠，該菌還能以辛酰溴苯腈為唯一碳源進(jìn)行生長。

本發(fā)明提供了假單胞菌MXB-03在辛酰溴苯腈講解中的應(yīng)用。在實(shí)驗(yàn)室搖瓶培養(yǎng)條件下辛酰溴苯腈的降解率達(dá)90％以上。該菌可以用發(fā)酵工業(yè)通用發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行生產(chǎn)。

本發(fā)明還提供了含有所述假單胞菌MXB-03的菌劑。

本發(fā)明還提供了所述假單胞菌MXB-03生產(chǎn)菌劑的方法。

?所述假單胞菌XB3生產(chǎn)菌劑的方法，具體為：

1）?將辛酰溴苯腈殘留的假單胞菌MXB-03的試管種接種于LB培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；

2）?將步驟1）培養(yǎng)好的菌種按10％的接種量接種入500升種子罐，培養(yǎng)至對數(shù)生長期，即種子液。

3）?將步驟2）所述種子液按10％的接種量接入生產(chǎn)罐進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，生產(chǎn)罐所用培養(yǎng)基與種子罐培養(yǎng)基相同，發(fā)酵完成后的培養(yǎng)液即為菌劑。

步驟1）中所述的LB培養(yǎng)基配方為：NaCl?10.00g/L,蛋白胨10.00g/L,酵母粉5.00g/L,pH7.0。