[發(fā)明專利]一種生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法及用途有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310199244.2 | 申請(qǐng)日： | 2013-05-27 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103308575A | 公開(kāi)（公告）日： | 2013-09-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王曉麗;賀玉明;李紅波;白長(zhǎng)勝 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中糧生化能源（龍江）有限公司 |
| 主分類號(hào)： | G01N27/26 | 分類號(hào)： | G01N27/26 |
| 代理公司： | 天津盛理知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12209 | 代理人： | 王來(lái)佳 |
| 地址： | 161100 黑龍*** | 國(guó)省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物 傳感 分析 測(cè)定 谷氨酸 含量 檢測(cè) 方法 用途 | ||
1.一種生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟包括：生物傳感分析儀采用兩點(diǎn)定標(biāo)法測(cè)定，將樣品稀釋，進(jìn)行加樣回收率實(shí)驗(yàn)確定校正系數(shù)，計(jì)算谷氨酸含量，即檢測(cè)得到谷氨酸含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法，其特征在于：具體步驟如下：
⑴發(fā)酵液樣品制備：取谷氨酸發(fā)酵液原液，稀釋到100-200倍，做三份平行樣，得發(fā)酵液樣品；?
⑵生物傳感分析儀定標(biāo)：生物傳感分析儀開(kāi)機(jī)后，待儀器自動(dòng)清洗完畢，進(jìn)樣綠燈亮后，吸取25μL標(biāo)準(zhǔn)液注入反應(yīng)池，待測(cè)定2～4次后，儀器自動(dòng)定標(biāo)，再吸取12.5μL標(biāo)準(zhǔn)液注入反應(yīng)池，反應(yīng)結(jié)束，按線性校正鍵，校正完畢再進(jìn)行定標(biāo)，然后進(jìn)行測(cè)樣，生物傳感分析儀測(cè)定發(fā)酵液樣品谷氨酸的測(cè)定值為X1；
⑶標(biāo)準(zhǔn)品樣品制備：向發(fā)酵液原液中加入谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品，之后稀釋到100-200倍，做三份平行樣，得標(biāo)準(zhǔn)品樣品，生物傳感分析儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品樣品谷氨酸的測(cè)定值為X2；
⑷結(jié)果計(jì)算：根據(jù)X1和X2計(jì)算加樣回收率和校正系數(shù)；根據(jù)下列公式計(jì)算生物傳感分析儀測(cè)得的谷氨酸含量，即檢測(cè)得到發(fā)酵液原液谷氨酸含量；
其中，計(jì)算公式：加樣回收率（%）=（X2-X1）*V/A*100；
式中:?X1—生物傳感分析儀測(cè)定發(fā)酵液樣品谷氨酸的測(cè)定值，mg/dL；
X2—生物傳感分析儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品樣品谷氨酸的測(cè)定值，mg/dL；
V—發(fā)酵液樣品的體積，dL；
A—添加谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量，mg；
校正系數(shù)=1/加樣回收率；
發(fā)酵液原液谷氨酸含量（g/dL）=?X1?*校正系數(shù)*稀釋倍數(shù)/1000；
式中:?X1—生物傳感分析儀測(cè)定發(fā)酵液樣品谷氨酸的測(cè)定值，mg/dL；
1000—單位換算系數(shù)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟⑴中樣品稀釋為：在谷氨酸發(fā)酵液原液為發(fā)酵培養(yǎng)6~12h時(shí)，將谷氨酸發(fā)酵液原液稀釋到100倍；在谷氨酸發(fā)酵液原液為發(fā)酵培養(yǎng)12h以后時(shí)，將谷氨酸發(fā)酵液原液稀釋到200倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟⑵中生物傳感分析儀為：SBA-40型生物傳感分析儀，SBA-40C型生物傳感分析儀，SBA-40E型生物傳感分析儀，SBA-40X型生物傳感分析儀，或SBA-50型生物傳感分析儀。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟⑵中標(biāo)準(zhǔn)液的組成成份及濃度為：50?mg/dL乳酸、100mg/dL谷氨酸和100mg/dL葡萄糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟⑵中生物傳感分析儀定標(biāo)時(shí)，進(jìn)25μL標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)定標(biāo)值為100，進(jìn)12.5μL標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)定標(biāo)值為50；每測(cè)定5~8個(gè)樣品重新定標(biāo)一次。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法，其特征在于：所述步驟⑶中向發(fā)酵液原液中加入谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量為：0.5X1*V～1.5X1*V，其中，X1為生物傳感分析儀測(cè)定發(fā)酵液樣品谷氨酸的測(cè)定值，單位為mg/dL，V為發(fā)酵液樣品的體積，單位為dL。
8.如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所述的生物傳感分析儀測(cè)定谷氨酸含量的檢測(cè)方法在測(cè)定谷氨酸含量方面的應(yīng)用。
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