[發明專利]一株耐鹽堿產吲哚乙酸的枯草芽孢桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201310198459.2
• 申請日: 2013-05-24
• 公開（公告）號: CN103275895A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 徐莉;張振;李輝信;陳雄;李偉明;李方卉;焦加國;劉滿強;陳小云;胡鋒
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09B3/00;C05F11/08;C12R1/125
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;傅婷婷

技術領域

本發明涉及一種微生物，涉及一株耐鹽堿產吲哚乙酸的枯草芽孢桿菌及其應用。?

背景技術

在土壤中許多微生物能夠溶解難溶態磷，促進植物對磷的吸收，增加作物產量和改善作物品質，將解磷微生物作為生物肥料，不但可以提高土壤中磷的利用效率，節肥增產，而且可改善土壤結構，提高土壤有機質含量。植物促生菌(Plant?Growth?Promoting?Bacteria，簡稱PGPB)被界定為在一定條件下有利于植物生長的自由生活在土壤、根際、根表、葉際的細菌。這些細菌能夠固氮、溶磷、溶鐵，并產生植物激素，如生長素、赤霉素、細胞分裂素和乙烯。此外，它們還能提高植物的抗逆性，包括干旱、高鹽堿、重金屬和有機污染物毒害。但現在大部分植物促生菌還未被馴化成能有效提高植物各種抗逆性的菌株，因此從植物根際土中分離得到能有效提高植物各種抗逆性的植物促生菌成為熱點。?

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述缺陷，提供一種枯草芽孢桿菌，能高效產吲哚乙酸并能在高鹽堿條件生長且能利用難溶性磷酸鹽為磷源進行生長。?

本發明的目的可通過如下技術方案實現：?

本發明的一種枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis?ZZ18），于2013年3月15日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，分類名為枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis），保藏號CGMCC?No.7324。?

所述枯草芽孢桿菌菌落較小為白色、隆起，邊緣整齊，表面光滑濕潤，不透明，產芽孢。?

所述枯草芽孢桿菌的生理生化特性是：革蘭氏陽性，兼性好氧，化能異養，接觸酶陽性，M.R和VP試驗陰性，淀粉水解陰性，明膠水解陽性，硝酸鹽還原陽性，檸檬酸鹽利用陰性。?

本發明所述的枯草芽孢桿菌培養時使用的主要氮源包括但不限于蛋白胨、酵母粉、硝酸鉀、硝酸銨、硫酸銨、谷氨酸；使用的主要碳源包括但不限于蔗糖、木糖、甘露醇、麥芽糖、乳糖、果糖、葡萄糖；使用的無機組分包括但不限于氯化鉀、氯化鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸三鈣、二水氯化鈣、七水合硫酸鎂、七水合硫酸亞鐵。本發明的枯草芽孢桿菌發酵可在?20～35℃，pH6～10的環境下進行。?

本發明所述的枯草芽孢桿菌分泌吲哚乙酸（IAA）的能力強，在30℃、180r/min搖床培養條件下24h其轉化IAA能力達53.47μg·mL^‐1。吲哚乙酸是植物激素的一種，能夠促進根的發育。產吲哚乙酸的菌種，往往附著在植物根系或葉表面，利用植物代謝產生分泌物的同時產生IAA和少量GA₃等植物激素來影響植物的生理過程和形態變化。表現為直接促進根的伸長，從而增大了與土壤中營養物質的接觸的機會；可提高植物體內源IAA的含量；誘導植物防衛基因的表達，提高植物體抗病，抗旱等抗逆性。作為本發明的優化方案，所述枯草芽孢桿菌的發酵在溫度為28℃、pH6～10下進行，該環境下產IAA量最高。?

作為本發明的進一步優化，所述枯草芽孢桿菌采用的碳源為甘露醇，采用的氮源為酵母粉的組合。利用上述碳源和氮源制得的培養基，培育出的枯草芽孢桿菌產IAA的量最高。?

本發明所述的枯草芽孢桿菌可以在高鹽堿度條件下進行生長并產IAA。在實驗室搖瓶條件下，所述枯草芽孢桿菌可以在pH為10的條件下生長且產IAA，并可以在LB培養基含鹽度為7%的條件下生長，在含鹽度為3%時可產IAA。?

本發明所述的枯草芽孢桿菌以難溶性磷酸鹽為磷源進行生長，并將其轉化為可溶性磷酸鹽。在實驗室搖瓶條件下，所述枯草芽孢桿菌對磷酸三鈣的轉化量達133.52mg·L^‐1。相對于空白對照的結果，所述枯草芽孢桿菌對磷酸三鈣的轉化量比空白對照高出96.08mg·L^‐1。?

有益效果：本發明提供了一株耐鹽堿產吲哚乙酸的枯草芽孢桿菌，能高產吲哚乙酸并能耐鹽堿生長且能利用難溶性磷酸鹽為磷源進行生長，可用于制備生物肥料。?

附圖說明

圖1是本發明菌株ZZ18的菌落圖；?

圖2表示ZZ18菌株對難溶性磷的利用情況；?

圖3表示不同裝液量對菌株ZZ18產IAA的影響；?

圖4表示不同初始pH對ZZ18菌株產IAA的影響；?

圖5表示不同碳源對菌株ZZ18產IAA的影響；?

圖6表示不同氮源對ZZ18菌株產IAA的影響；?

圖7表示不同含鹽度對ZZ18菌株產IAA的影響；?

生物材料保藏信息?