[發明專利]一種原位膀胱癌動物模型以及鑒定方法

無效

• 申請號: 201310196327.6
• 申請日: 2013-05-24
• 公開（公告）號: CN104173115A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 潘春武;齊雋
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬新華醫院
• 主分類號: A61D7/00
• 分類號: A61D7/00
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 金重慶

技術領域

本發明涉及動物模型領域，具體地說，是一種原位膀胱癌動物模型以及鑒定方法。

背景技術

在我國，膀胱腫瘤是泌尿系統高發的腫瘤，建立膀胱癌動物模型對于研究人類膀胱癌有重要意義。國內外已有研究和報道證實N-甲基亞硝基脲(N-methyl?nitrosourea，MNU)可作為化學致癌劑用于建立原位膀胱癌動物模型。但模型建立后只能通過處死大鼠進行病理學診斷以判斷模型是否成功建立，從而無法對建模后的動物進行下一步的體內實驗。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種原位膀胱癌動物模型。

本發明的再一的目的是，提供一種原位膀胱癌動物模型的建立方法。

本發明的另一的目的是，提供一種原位膀胱癌動物模型的鑒定方法。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案是：一種原位膀胱癌動物模型，所述的動物模型的建立方法為：SD大鼠膀胱內灌注20mg/mL致癌劑MNU溶液誘發膀胱癌，每次灌注0.1mL，每周灌注1次，共6次。

所述的動物模型的建立方法包括以下步驟：

a)?SD大鼠用2%?50mg/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉，麻醉起效后仰臥固定；

b)?75%酒精消毒會陰部；

c)?取大鼠導尿管，石蠟油潤滑后，從尿道外口插入，經尿道置入膀胱，進入膀胱后可見尿液從導尿管流出；

d)?抽盡膀胱內尿液，注入20mg/mL?的MNU溶液0.1mL；

e)?拔除導尿管，大鼠平臥，等待麻醉清醒。

為實現上述第二個目的，本發明采取的技術方案是：一種原位膀胱癌動物模型的建立方法，所述的動物模型的建立方法為：SD大鼠膀胱內灌注20mg/mL致癌劑MNU溶液誘發膀胱癌，每次灌注0.1mL，每周灌注1次，共6次。

所述的動物模型的建立方法包括以下步驟：

a)?SD大鼠用2%?50mg/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉，麻醉起效后仰臥固定；

b)?75%酒精消毒會陰部；

c)?取大鼠導尿管，石蠟油潤滑后，從尿道外口插入，經尿道置入膀胱，進入膀胱后可見尿液從導尿管流出；

d)?抽盡膀胱內尿液，注入20mg/mL?的MNU溶液0.1mL；

e)?拔除導尿管，大鼠平臥，等待麻醉清醒。

為實現上述第三個目的，本發明采取的技術方案是：所述的原位膀胱癌動物模型的鑒定方法，所述的鑒定方法是對大鼠進行膀胱CT掃描。

包括以下步驟：

a)?膀胱灌注后第7周，對大鼠進行膀胱CT掃描，膀胱CT掃描方法如下：

b)?SD大鼠用2%?50mg/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉，麻醉起效后仰臥固定；

c)?經尿道膀胱內置入導尿管，注入1-2mL生理鹽水，以充盈膀胱，注入生理鹽水后，用絲線輕輕結扎尿道外口，以防膀胱內液體溢出；

d)?GE?light?speed?16層螺旋CT對大鼠下腹部進行掃描，掃描層厚1.25mm；

e)?掃描結束后，抽出膀胱內液體。

本發明優點在于：

1、為原位膀胱癌動物模型提供了一種新的構建方法；

2、提供了一種新的通過活體檢測膀胱癌建模的方法，可剔除不利于進一步體內實驗的腫瘤模型，同時可利用CT掃描來評估膀胱癌動物模型治療前后的效果；

3、通過CT?掃描診斷大鼠原位膀胱癌的方法更加靈敏、準確率更高、更直接方便，為進一步動物模型的實驗研究提供便利。

附圖說明

圖1.?經尿道膀胱內置管灌注。

A：雌性SD大鼠會陰部矢狀面示意圖。B：經尿道膀胱內置管示意圖：大鼠平臥固定，向頭側推移下腹部皮膚（紅色箭頭）以牽拉尿道外口向上前傾，充分暴露尿道外口；蘸有石蠟油的導尿管緊貼尿道外口后壁緩緩插入（藍色箭頭），導尿管與水平成角α<45度；當遇到阻力時停止插入，松開推移的皮膚，向尾側旋轉導尿管方向，使導尿管方向接近水平（黑色箭頭），再緩緩插入，進入膀胱時有突破感，插入導尿深度2.5-3cm。若旋轉導尿管方向后仍有阻力，應立即拔出導尿管改變α角度重復上述步驟。C：導尿管插入尿道外口。D：導尿管進入膀胱，抽出淡黃色尿液。

圖2.?膀胱灌注7周后大體觀。