[發明專利]一種玫瑰石斛素的制備方法

無效

• 申請號: 201310194528.2
• 申請日: 2013-05-23
• 公開（公告）號: CN103232329A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07C43/23
• 分類號: C07C43/23;C07C41/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，特別是涉及一種玫瑰石斛素的制備方法。

背景技術

玫瑰石斛素（erepidatin）為玫瑰石斛中的聯芐類成分，無色結晶，熔點98-99℃，分子量318，分子結構式：

。

玫瑰石斛素易溶于氯仿、丙酮等有機溶劑，極微溶于水。羅文娟等采用噻唑藍法篩選由金釵石斛提取分離的31種單體化合物，發現玫瑰石斛素、鼓槌聯芐、4，4．二羥基．3，3，5．三甲氧基二芐3種化合物對人肝癌高侵襲細胞株的增殖具有一定抑制作用。現有制備玫瑰石斛素的方法，多采用常壓、常規試劑提取，提取效率低，后續純化步驟繁瑣，污染嚴重。如馬國祥等人采用的方法是乙醇回流提取然后再采用硅膠柱層析，洗脫溶劑多，污染嚴重，很難放大生產。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種操作簡便、污染小的玫瑰石斛素的制備方法。

本發明的目的是采用以下技術方案實現的：一種玫瑰石斛素的制備方法，其特征在于包含以下步驟：

1）將玫瑰石斛原料粉碎20-80目，置于CO₂超臨界萃取罐中萃取，CO₂流量為1-5ml/min/g原料，選用90%乙醇做夾帶劑，流量為0.1-0.5ml/min/g原料，萃取溫度30-60℃，壓力20-30Mpa，萃取時間1-4h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收試劑得粗提物；

2）上述粗提物以氯仿、甲醇、水為溶劑系統，取上相做固定相、下相為流動相，采用高速逆流色譜純化，主機轉速700-1000rpm，流動相流速1-4ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥即得。

步驟2）中的氯仿、甲醇、水為溶劑混合比例為：4-9:1-5:3-9。

采用本方法制備玫瑰石斛素，提取效率高，操作方便，污染小，易于工業化放大。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

將玫瑰石斛原料粉碎40目，取2kg，置于超臨界萃取罐中萃取，通入CO₂流量為2ml/min/g原料，同時通入90%乙醇做夾帶劑，流量為0.1ml/min/g原料，在萃取溫度35℃，壓力20Mpa，萃取時間3h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收氯仿得粗提物。取氯仿、甲醇、水按4:1:3混合，取上層注入高速逆流色譜管做固定相，取下層做流動相，流速2ml/min，主機轉速900rpm，流動相溶解粗提物，進樣，根據圖譜收集流分，連續制備，流分合并濃縮干燥，得玫瑰石斛素1.1g，經HPLC檢測，含量98.2%。

實施例2：

將玫瑰石斛原料粉碎60目，取2kg，置于超臨界萃取罐中萃取，通入CO₂流量為4ml/min/g原料，同時通入90%乙醇做夾帶劑，流量為0.3ml/min/g原料，在萃取溫度40℃，壓力25Mpa，萃取時間3h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收氯仿得粗提物。取氯仿、甲醇、水按6:2:5混合，取上層注入高速逆流色譜管做固定相，取下層做流動相，流速3ml/min，主機轉速800rpm，流動相溶解粗提物，進樣，根據圖譜收集流分，連續制備，流分合并濃縮干燥，得玫瑰石斛素1.3g，經HPLC檢測，含量97.8%。

實施例3：

將玫瑰石斛原料粉碎80目，取2kg，置于超臨界萃取罐中萃取，通入CO₂流量為5ml/min/g原料，同時通入90%乙醇做夾帶劑，流量為0.4ml/min/g原料，在萃取溫度38℃，壓力23Mpa，萃取時間3h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收氯仿得粗提物。取氯仿、甲醇、水按7:4:8混合，取上層注入高速逆流色譜管做固定相，取下層做流動相，流速1ml/min，主機轉速900rpm，流動相溶解粗提物，進樣，根據圖譜收集流分，連續制備，流分合并濃縮干燥，得玫瑰石斛素1.1g，經HPLC檢測，含量97.5%。