[發明專利]一種毛蘭菲的制備方法

無效

• 申請號: 201310194464.6
• 申請日: 2013-05-23
• 公開（公告）號: CN103265414A
• 公開（公告）日: 2013-08-28
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07C43/23
• 分類號: C07C43/23;C07C41/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，特別是涉及一種毛蘭菲的制備方法。

背景技術

毛蘭菲（confusarin）化學名稱2、7-二羥基一1、5、6-三甲氧基菲，無色片狀結晶，熔點191.1-192℃，分子量300，分子結構式：

。

毛蘭菲為酚類化合物，易溶于氯仿、丙酮、甲醇等有機溶劑，極微溶于水。馬國祥等研究發現毛蘭菲(eonfusarin)對體外培養的腫瘤細胞株K562的生長具有不同的抑制作用，其細胞增殖抑制率為50%的藥物濃度分別為0.0065、5.34、0.32、46.15μg/ml毛蘭菲(eonfusarin)還有抗氧化活性，對三價鐵硫氰酸鹽的抗氧活性較BHA強。現有制備鼓毛蘭菲的方法，多采用常壓、常規試劑提取，提取效率低，而且后續純化步驟繁瑣，污染嚴重。如馬國祥等人采用的方法是乙醇回流提取然后再采用硅膠柱層析，洗脫溶劑多，污染嚴重，很難放大生產。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種操作簡便、污染小的毛蘭菲的制備方法。

本發明的目的是采用以下技術方案實現的：一種毛蘭菲的制備方法，其特征在于包含以下步驟：

1）將馬鞭石斛原料粉碎20-80目，置于CO₂超臨界萃取罐中萃取，CO₂流量為1-5ml/min/g原料，萃取溫度30-60℃，壓力20-30Mpa，萃取時間1-4h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收試劑得粗提物；

2）上述粗提物以氯仿、甲醇、水為溶劑系統，取上相做固定相、下相為流動相，采用高速逆流色譜純化，主機轉速700-1000rpm，流動相流速1-4ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥即得。

步驟2）中的氯仿、甲醇、水為溶劑混合比例為：5-10:2-4:4-9。

采用本方法制備毛蘭菲，提取效率高，純化步驟簡單易操作，而且污染小，易于工業化放大。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

將馬鞭石斛原料粉碎40目，取2kg，置于超臨界萃取罐中萃取，通入CO₂流量為3ml/min/g原料，在萃取溫度40℃，壓力25Mpa，萃取時間2h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收氯仿得粗提物。取氯仿、甲醇、水按5:2:5混合，取上層注入高速逆流色譜管做固定相，取下層做流動相，流速2ml/min，主機轉速800rpm，流動相溶解粗提物，進樣，根據圖譜收集流分，連續制備，流分合并濃縮干燥，得毛蘭菲1.5g，經HPLC檢測，含量98.2%。

實施例2：

將馬鞭石斛原料粉碎80目，取2kg，置于超臨界萃取罐中萃取，通入CO₂流量為1ml/min/g原料，在萃取溫度30℃，壓力20Mpa，萃取時間3h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收氯仿得粗提物。取氯仿、甲醇、水按7:3:9混合，取上層注入高速逆流色譜管做固定相，取下層做流動相，流速3ml/min，主機轉速900rpm，流動相溶解粗提物，進樣，根據圖譜收集流分，連續制備，流分合并濃縮干燥，得毛蘭菲1.2g，經HPLC檢測，含量95.7%。

實施例3：

將馬鞭石斛原料粉碎60目，取2kg，置于超臨界萃取罐中萃取，通入CO₂流量為6ml/min/g原料，在萃取溫度35℃，壓力27Mpa，萃取時間2h，萃取物用氯仿溶解，濾過，回收氯仿得粗提物。取氯仿、甲醇、水按9:3:7混合，取上層注入高速逆流色譜管做固定相，取下層做流動相，流速1ml/min，主機轉速850rpm，流動相溶解粗提物，進樣，根據圖譜收集流分，連續制備，流分合并濃縮干燥，得毛蘭菲1.1g，經HPLC檢測，含量97.3%。