[發(fā)明專利]一種以假鱗莖誘導(dǎo)假鱗莖的白芨高效繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310193351.4
• 申請(qǐng)日: 2013-05-23
• 公開（公告）號(hào): CN103299903A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 石云平;趙志國(guó);黃寧珍;付傳明;唐鳳鸞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)中國(guó)科學(xué)院廣西植物研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標(biāo)事務(wù)所有限責(zé)任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物無(wú)性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種以假鱗莖誘導(dǎo)假鱗莖的白芨高效繁殖方法。

背景技術(shù)

白芨（Bletilla?striata(Thunb.)?Reichb.f.）又名白及、地螺絲、白雞兒、刀口藥、連及草，為蘭科多年生草本植物。在我國(guó)白芨作為藥用已有上千年的歷史，其假鱗莖具收斂止血、補(bǔ)肺、消腫生肌之功效，外敷治療創(chuàng)傷出血、痛腫、燙傷和療瘡，內(nèi)治吐血、肺病、咳血、慢性胃潰瘍以及腫瘤等?，F(xiàn)代研究表明，白芨的提取物不僅無(wú)毒副作用，還具有較強(qiáng)的抗氧化和抗衰老作用，添加到化妝品中可以起到消炎、止癢、消退色斑、消除痤瘡、防止粗糙、抗凍防裂等作用，兼?zhèn)浔＝?、護(hù)膚及美容之功效。此外，白芨在化工、陶瓷以及觀賞園林等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。

白芨原產(chǎn)我國(guó)，分布于廣西、貴州、云南、安徽和四川等省，廣西為主產(chǎn)區(qū)之一。白芨生于蔭蔽草叢、林下潮濕地或巖石縫中，產(chǎn)量低。一直以來(lái)，市場(chǎng)上流通的白芨原料以野生為主。由于其應(yīng)用日益廣泛，需求量與日俱增，價(jià)格大幅攀升，已由2000年的8元/kg上升到目前的200元/kg。然而白芨遭連年掠奪式地采挖、其天然生境日益惡化以及自身繁殖能力差等因素，野生蘊(yùn)藏量正以10%～15%逐年遞減，分布范圍逐年縮小，瀕臨滅絕邊緣，已被國(guó)家列為重點(diǎn)保護(hù)的野生藥用植物之一。因此，白芨的人工栽培不僅可以獲取豐厚的經(jīng)濟(jì)回報(bào)，而且還可以有效保護(hù)白芨的野生自然資源，維護(hù)生態(tài)系統(tǒng)多樣性，具有良好的社會(huì)效益。

目前白芨的主要繁殖方式為分株繁殖，不僅繁殖系數(shù)低、用種量大、占用藥用資源以及品種退化等諸多問(wèn)題，使得白芨很難大面積規(guī)?；a(chǎn)。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展，白芨組培快繁技術(shù)得到很大發(fā)展。該技術(shù)分為初代誘導(dǎo)、繼代增殖、生根培養(yǎng)和移栽等環(huán)節(jié)，繁殖系數(shù)主要體現(xiàn)在繼代增殖這一技術(shù)環(huán)節(jié)，目前白芨快繁技術(shù)的繁殖系數(shù)為2~5，以此計(jì)算其組培苗的成本，價(jià)格居高不下，成了制約其組培苗推廣應(yīng)用的主要因素。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)不足，提供一種白芨組培苗更高繁殖系數(shù)的方法，在白芨組培快繁技術(shù)的生根階段，以假鱗莖誘導(dǎo)假鱗莖，進(jìn)一步提高繁殖系數(shù)。該方法操作簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，高效穩(wěn)定。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是：

一種以假鱗莖誘導(dǎo)假鱗莖的白芨高效繁殖方法，采用現(xiàn)有方法進(jìn)行初代誘導(dǎo)（種子萌發(fā)）、繼代增殖步驟獲得叢生芽，與現(xiàn)有技術(shù)不同的是：生根壯苗階段采用以假鱗莖誘導(dǎo)假鱗莖的方法，包括以下步驟：

（1)在超凈工作臺(tái)上，將白芨叢生芽切分成單芽接入生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20～40?d，白芨芽的基部膨大形成假鱗莖，并長(zhǎng)有根；所述生根培養(yǎng)基為：1/2MS+6-BA?0.1～0.5?mg/L+IBA?0.3～0.8?mg/L+IAA?0.5～1.5?mg/L+0.1%活性炭+15%馬鈴薯+蔗糖20?g/L+瓊脂5?g/L，pH值為6.5；

（2）在超凈工作臺(tái)上，將滅菌過(guò)的誘導(dǎo)劑加入步驟（1）中誘導(dǎo)出小假鱗莖的組培苗中，每瓶加入10～20?ml，培養(yǎng)40～50?d，原假鱗莖上長(zhǎng)出3～5個(gè)新的小假鱗莖，形成叢生假鱗莖，每個(gè)小假鱗莖基部都長(zhǎng)有3～8條不定根；所述誘導(dǎo)劑為：KT?0.5～2.5?mg/L+IAA?0.2～1.0?mg/L+2,4-D?0.1～1.0?mg/L，pH值為6.5；

（3）將步驟（2）中生長(zhǎng)有叢生假鱗莖、芽高達(dá)2～5?cm的組培苗移出培養(yǎng)室，室內(nèi)煉苗3?d，取苗，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，用刀將叢生假鱗莖從每個(gè)假鱗莖的基部切分為單個(gè)小假鱗莖，在消毒藥液中浸泡10?s，放于盤中備用；所述消毒液為：噻唑鋅500倍液；

（4）將步驟（3）的小假鱗莖假植于消毒過(guò)的樹皮屑中30～60?d，在溫室大棚內(nèi)保持溫度為22～28℃，濕度為65%～80%；之后，移栽于1/2腐殖土+1/2沙子中，成活率可達(dá)87.9%～98.2%。

所述步驟（1）中生根培養(yǎng)基優(yōu)選為：1/2MS+6-BA0.2?mg/L+IBA0.5?mg/L+IAA1.0?mg/L+0.1%活性炭+15%馬鈴薯+蔗糖20?g/L+瓊脂5?g/L，pH值為6.5。

所述步驟（2）中誘導(dǎo)劑優(yōu)選為：KT?1.5?mg/L+IAA?0.5?mg/L?+2,4-D?0.5?mg/L，pH值為6.5。

所述步驟（2）中誘導(dǎo)小假鱗莖培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是：培養(yǎng)溫度為25±3℃,?光照時(shí)間為12?h/d,?光照強(qiáng)度為2000?lx。