[發(fā)明專利]產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310192348.0
• 申請日: 2013-05-22
• 公開（公告）號: CN103243052A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳山;浦媛媛;鄒青松;王曉;王清;劉玫;張義平;姚曉麥;黃磊
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

1.一種產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）腸膜明串珠菌的葡萄糖耐受性培養(yǎng)；

（2）腸膜明串珠菌的復壯培養(yǎng)；

（3）腸膜明串珠菌的產(chǎn)酶培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于：所述葡萄糖耐受性培養(yǎng)是原始腸膜明串珠菌取種，接種于以葡萄糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)48～60h。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于葡萄糖耐受性培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為：葡萄糖100～120g/L，KH₂PO₄0.3～0.35g/L，Na₂HPO₄1.4～1.5g/L，蛋白胨1.5～2g/L，酵母膏8～10g/L，瓊脂16～20g/L，蒸餾水1L，pH7.0～7.2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于：所述復壯培養(yǎng)是選取耐受性培養(yǎng)后茁壯的單菌落接種于43號培養(yǎng)基進行培養(yǎng)24～48h。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于復壯培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為：蔗糖130g/L，KH₂PO₄0.3g/L，Na₂HPO₄1.4g/L，蛋白胨2g/L，瓊脂20g/L，蒸餾水1L，pH7.0～7.2。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于：所述產(chǎn)酶培養(yǎng)經(jīng)歷種子培養(yǎng)基培養(yǎng)和產(chǎn)酶培養(yǎng)基培養(yǎng)兩個階段；選取復壯培養(yǎng)后茁壯的單菌落接種于種子培養(yǎng)基，待菌種繁殖至對數(shù)期時，以2%v/v的接種量接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基，培養(yǎng)21～25h后對培養(yǎng)液以12000r/min、4℃、30min的條件進行離心去除菌體，收集上清液即為右旋糖酐蔗糖酶酶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于種子培養(yǎng)基的配方為：蔗糖50～60g/L，KH₂PO₄0.3～0.35g/L，Na₂HPO₄1.4～1.5g/L，蛋白胨2～2.5g/L，酵母膏8～10g/L，蒸餾水1L，pH6.8～7.0；產(chǎn)酶培養(yǎng)基的配方為：蔗糖50～60g/L，KH₂PO₄0.3～0.35g/L，Na₂HPO₄1.4～1.5g/L，蛋白胨1.5～2g/L，酵母膏8～10g/L，牛肉膏8～10g/L，蒸餾水1L，pH6.8～7.0。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7任一所述的產(chǎn)右旋糖酐蔗糖酶優(yōu)良菌種的選育方法，其特征在于：固體培養(yǎng)基培養(yǎng)菌種的條件為25±3℃；液體培養(yǎng)基培養(yǎng)菌種的條件為25±3℃、150±50r/min，裝液量為所盛容器標準容量的20%。