[發(fā)明專利]一種提高泰樂菌素A組分的提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310190974.6
• 申請日: 2013-05-22
• 公開（公告）號: CN103709218A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 許永興;胡露華;周晉武;金康康
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江普洛康裕生物制藥有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/08;C07C59/255;C07C51/41
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務(wù)所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬抗生素藥物領(lǐng)域，具體涉及泰樂菌素的提取技術(shù)，可有效提高泰樂菌素產(chǎn)品中的A組分。

背景技術(shù)

泰樂菌素是一種十六元內(nèi)酯類禽畜專用抗生素，它是由弗氏鏈霉菌(streptomyces?fradiae)在發(fā)酵過程中同時獲得A、B、C、D四個組分的混合物，其中：A組分為泰樂菌素(Tylosin)?，?B組分為脫碳糖泰樂菌素((Desmycosin)?，?C組分為大菌素(Macrosin)?，?D組分為雷洛菌素(Relomycin)?以及結(jié)構(gòu)類似物拉克亭菌素。以上四個組分中，除雷洛菌素外其它組分在試管內(nèi)均有抗菌活性，而泰樂菌素A組分在體內(nèi)證實有較高活性。常見泰樂菌素產(chǎn)品是酒石酸泰樂菌素和磷酸泰樂菌素及泰樂菌素堿。泰樂菌素對革蘭氏陽性菌及某些陰性菌（如金黃色葡萄球菌、化膿鏈球菌、肺炎雙球菌等）以及支原體、弧菌及其他致病因子有很高的活性，是世界公認治療和預防畜禽支原體感染的首選藥物。

目前，國內(nèi)泰樂菌素的一般提取工藝是：泰樂菌素發(fā)酵液預處理后經(jīng)板框過濾獲得發(fā)酵濾液，用乙酸丁酯對發(fā)酵濾液進行萃取得富含泰樂菌素的有機相，再用酸水進行反萃取，經(jīng)中和、脫色、濃縮、干燥后得酒石酸泰樂菌素或磷酸泰樂菌素精品。

上述工藝所用的乙酸丁酯是一種優(yōu)良的萃取劑，對泰樂菌素具有較好的溶解度，但在實際生產(chǎn)中損耗較大。目前有關(guān)泰樂菌素萃取溶媒的專利都是從這個角度出發(fā)，優(yōu)化萃取溶媒，降低溶媒損耗。

如專利CN1432575A、CN1374406A通過將泰樂菌素發(fā)酵濾液用膜過濾或噴霧干燥濃縮設(shè)備濃縮后減少發(fā)酵濾液的體積，從而減少所需萃取劑的用量來減少溶媒的損耗。又如專利CN101565438A、CN101565439A采用氯仿和乙酸丁酯復合使用的方式進行萃取，由于氯仿具有更優(yōu)異的溶解性能，從而減少溶媒的用量。又如專利CN101450959A通過往發(fā)酵濾液中加鹽的方式，減少泰樂菌素在水中的溶解度，進而減少或完全避免使用溶媒。

另一方面，乙酸丁酯對泰樂菌素及其結(jié)構(gòu)類似物的雜質(zhì)以及泰樂菌素A、B、C、D各組分之間的分離度并不是很好。上述專利中，無論是發(fā)酵濾液濃縮、采用氯仿混合溶媒還是往發(fā)酵濾液中加鹽的方式，都會因為處理方法問題導致泰樂菌素發(fā)酵濾液中的雜質(zhì)在水中的溶解度下降或在有機溶劑中的溶解度增加，從而增加乙酸丁酯萃取液中的雜質(zhì)含量，使得產(chǎn)品中泰樂菌素A組分下降。

“發(fā)酵異?！笔巧幬镄袠I(yè)的一個普遍現(xiàn)象，泰樂菌素發(fā)酵異常會導致出現(xiàn)雜質(zhì)含量增多、C組分無法徹底轉(zhuǎn)化、D組分大幅度升高等現(xiàn)象。由于乙酸丁酯對雜質(zhì)及泰樂菌素C、D的分離性能不好，僅僅采用乙酸丁酯作為萃取劑無法得到符合質(zhì)量要求的產(chǎn)品。

所以盡管上述各專利方法減少了溶媒損耗并提高了產(chǎn)品收率，但這些方法依然無法滿足對泰樂菌素產(chǎn)品質(zhì)量方面的要求，尤其是在處理“異常發(fā)酵”批次時并無太大幫助。因此，一種可以提高泰樂菌素A組分的純化方法還是很有需要的，本發(fā)明所提供的方法可以在一定程度上提高泰樂菌素A組分。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點和不足，發(fā)明人旨在提供一種提高泰樂菌素A組分的提取方法，在提高產(chǎn)品收率的同時，一方面解決溶媒損耗問題，一方面解決泰樂菌素發(fā)酵異常的問題。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案得以實施的：

一種提高泰樂菌素A組分的提取方法，包括如下步驟：

在泰樂菌素發(fā)酵濾液中加入復合溶媒中進行萃取，得到的萃取液（即飽含泰樂菌素的有機相）采用磷酸溶液或酒石酸溶液進行反萃取獲得水提液，獲得的水提液經(jīng)中和、脫色、噴霧干燥得到磷酸泰樂菌素或酒石酸泰樂菌素精品或者水提液在吹盡溶媒后加堿調(diào)pH值，使泰樂菌素堿從水提液中析出，經(jīng)離心、干燥獲得泰樂菌素堿，其中：所述的復合溶媒為甲苯與乙酸丁酯或乙酸異丁酯混合物，復合溶媒中甲苯比例為70%~95%（V/V），余量為乙酸丁酯或乙酸異丁酯。

研究發(fā)現(xiàn)，采用甲苯作為萃取劑分離純化泰樂菌素可以獲得比乙酸丁酯更高的泰樂菌素A組分，且甲苯對于泰樂菌素雜質(zhì)及泰樂菌素C、D組分具有更高的分離效率。但甲苯對泰樂菌素的溶解度稍差，加入一定比例的乙酸丁酯或乙酸異丁酯形成的復合溶媒，可以增加溶媒對泰樂菌素的萃取能力。通過實驗發(fā)現(xiàn)，復合溶媒中甲苯的比例越高，溶媒對泰樂菌素A的選擇性越好。當復合溶媒中甲苯的比例低于70%時，復合溶媒對泰樂菌素A組分的提高并沒有明顯的幫助。另一方面，需要加入少量的乙酸丁酯或乙酸異丁酯來改善復合溶媒對泰樂菌素的溶解能力。所以復合溶媒中甲苯的合理比例為70%~95%（V/V），余量為乙酸丁酯或乙酸異丁酯。