[發明專利]一種含有達瑪烷型人參皂苷的水稻新種質的創制方法

有效

• 申請號: 201310186965.X
• 申請日: 2013-05-18
• 公開（公告）號: CN103333914A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 黃志偉;鄭金貴;程祖鋅;許明;林俊城;黃昕穎;楊志堅
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種含有達瑪烷型人參皂苷的水稻新種質的創制方法，其特征在于其步驟如下：

1）?將達瑪烯二醇合成酶基因的全長cDNA，其序列如SEQ?ID?No.1所示，構建到雙T-DNA植物表達載體上，獲得重組植物表達載體pCDMAR-DS-hpt；

2）?采用農桿菌介導法，將重組植物表達載體pCDMAR-DS-hpt轉化到水稻中，經篩選培育后得到含有達瑪烷型人參皂苷的水稻新種質。

2.如權利要求1中所述的含有達瑪烷型人參皂苷的水稻新種質的創制方法，其特征在于步驟1）具體的為：從人參屬植物中克隆出達瑪烯二醇合成酶基因的全長cDNA，其序列如SEQ?ID?No.1所示；設計合成達瑪烯二醇合成酶基因編碼序列兩端的特異引物，通過PCR擴增，獲得該基因的編碼區；將該編碼區構建到雙T-DNA植物表達載體上，獲得含有達瑪烯二醇合成酶基因編碼序列的重組植物表達載體pCDMAR-DS-hpt。

3.如權利要求2中所述的含有達瑪烷型人參皂苷的水稻新種質的創制方法，其特征在于步驟1）達瑪烯二醇合成酶基因的全長cDNA的來源為：從竹節人參中克隆出達瑪烯二醇合成酶基因的全長cDNA，其序列如SEQ?ID?No.1所示。

4.如權利要求1中所述的含有達瑪烷型人參皂苷的水稻新種質的創制方法，其特征在于步驟2）具體為：采用凍融法，將重組植物表達載體pCDMAR-DS-hpt轉化到農桿菌LBA4404中，獲得了含有達瑪烯二醇合成酶基因的重組農桿菌；將獲得的重組農桿菌侵染水稻的胚性愈傷組織，經過抗性愈傷組織的篩選、分化和生根培養，及進一步的篩選培育，獲得了含有達瑪烷型人參皂苷的水稻新種質。