[發明專利]一種香豆素衍生物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201310185722.4
• 申請日: 2013-05-17
• 公開（公告）號: CN103275071A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 魏春英;高寧
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C07D405/14
• 分類號: C07D405/14;A61P35/00
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 楊耀田

技術領域

本發明涉及香豆素衍生物，具體涉及香豆素衍生物7-[[4-[2,6-bis(2-pyridyl)-4-pyridyl]phenyl]methylamino]-4-methyl-chromen-2-one及其制備方法和它的用途。

背景技術

癌癥是嚴重威脅人類健康和生命的重大疾病，已經成為人類死亡的第二大病因。DNA拓撲異構酶I是一種控制和改變細胞代謝過程中DNA拓撲狀態的酶，它參與DNA的復制、轉錄以及有絲分裂中染色體的分離和重組等過程，是癌癥治療的熱門靶點。近年來發現，拓撲異構酶I也是抗細菌、抗真菌和抗病毒藥物作用的靶點。目前已報道的以及臨床上使用的拓撲異構酶I抑制劑（如喜樹堿類似物）由于結構復雜、水溶性差和不穩定等因素引起的嚴重毒副作用限制了這些藥物的應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種香豆素衍生物及其制備方法，該衍生物可作為DNA拓撲異構酶I的抑制劑，也可在制備抗腫瘤藥物中應用。

本發明提供的一種香豆素衍生物，是7-[[4-[2,6-bis(2-pyridyl)-4-pyridyl]phenyl]methylamino]-4-methyl-chromen-2-one，其結構式如下：

本發明提供的香豆素衍生物的合成路線如下：

本發明提供的一種香豆素衍生物的制備方法，包括以下步驟：

（1）用2-乙酰吡啶和4-甲基苯甲醛制備4’-（4-甲基苯基）-2,2’:6’,2’’-三聯吡啶（化合物Ⅰ），具體步驟見下述文獻記載：Bo?Tang,et?al,J.Am.Chem.Soc.,2009,131,3016-3023。

（2）用4’-（4-甲基苯基）-2,2’:6’,2’’-三聯吡啶（化合物I）制備4’-（4-溴甲基苯基）-2,2’:6’,2’’-三聯吡啶（化合物Ⅱ）。具體步驟見下述文獻記載：Bo?Tang,et?al,J.Am.Chem.Soc.,2009,131,3016-3023。

（3）將7-氨基-4-甲基香豆素和4’-（4-溴甲基苯基）-2,2’:6’,2’’-三聯吡啶（化合物Ⅱ）按摩爾比1.8～2.0﹕1加入1,4-二氧六環中，加熱回流39～40小時，將溶劑旋轉蒸發，粗產物用硅膠柱色譜進行分離得香豆素衍生物，其洗脫劑為體積比1﹕9.6～9.7的CH₃OH和CHCl₃。

本發明所提供的香豆素衍生物能鍵合到雙螺旋DNA，抑制拓撲異構酶I的活性，同時有效抑制MCF7和HepG2癌細胞的生長繁殖，并將MCF7和HepG2癌細胞的細胞周期阻滯在S期，可用于抗腫瘤藥物的制備。

與現有技術相比本發明具有以下有益效果：

本發明提供的香豆素衍生物制備方法簡單，反應條件溫和，易于大量制備；此香豆素衍生物能將MCF7和HepG2癌細胞細胞周期阻滯在S期，有效抑制癌細胞的生長繁殖，IC₅₀值分別為1.54×10^-6和3.67×10^-6M，抗腫瘤效果顯著；本發明制備的香豆素衍生物與雙螺旋DNA有很強的親和能力，結合常數一般為10⁶M；本發明制備的香豆素衍生物顯著抑制拓撲異構酶I的活性，有很好的藥用前景，如可用于制備抗真菌、抗病毒和抗細菌的藥物。

附圖說明

圖1實施例1制備的香豆素衍生物與小牛胸腺DNA相互作用的紫外可見吸收滴定光譜。箭頭表示逐漸增加DNA的濃度。實驗中在參比池也加入相同濃度的DNA，扣除DNA本身的吸收。

圖2在5mM?Tris-HCl，50mM?NaCl(pH7.4)條件下，不同濃度的實施例1制備的香豆素衍生物對pBR322電泳位移的影響。

圖3不同濃度的實施例1制備的香豆素衍生物抑制拓撲異構酶I（Topo?I）的凝膠電泳實驗圖，其中從左到右條帶的順序分別為pBR322，pBR322+Topo?I，pBR322+Topo?I+1μM香豆素衍生物，pBR322+Topo?I+2μM香豆素衍生物，pBR322+Topo?I+5μM香豆素衍生物，pBR322+Topo?I+10μM香豆素衍生物，pBR322+Topo?I+15μM香豆素衍生物，pBR322+Topo?I+20μM香豆素衍生物和pBR322+Topo?I+50μM香豆素衍生物。

圖4孵育72小時后實施例1制備的香豆素衍生物對MCF7細胞活力的影響。