[發明專利]一種高效快速繁殖金線蓮組培苗的方法

無效

• 申請號: 201310185366.6
• 申請日: 2013-05-20
• 公開（公告）號: CN104160956A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 潘俊宇;潘素芬;翟全瓊;張雄森;黃云輝;梁燊
• 申請（專利權）人: 廣西俊宇原生本草生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及到一種高效快速繁殖金線蓮組培苗的方法。

背景技術

金線蓮別名金線蘭、金絲草，為蘭科開唇植物花葉蘭屬多年生珍稀中草藥。它在民間使用范圍較廣，素有“藥王”、“金草”、“神草”、“鳥人參”等美稱。經有關部門測定發現，金絲蓮中氨基酸組成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于國產和野生西洋參。幾百年來作為民間常用草藥，而且需求量越來越大。

隨著野生資源日漸匱乏，金線蓮目前只能夠依靠人工栽培來滿足市場需求。

金線蓮屬于蘭科植物，其種子發芽率很低，所以通過有性繁殖來發展繁殖金線蓮不是明智之舉。當前通常采用的是無性繁殖，通過扦插進行繁殖，金線蓮種苗成活率低，批量培養也不可行。大批量生產繁殖時，最行之有效的方法是通過組織培養來繁殖。

目前，金線蓮組培通常采用的是莖段繁殖技術，該技術的實施步驟為：莖段→消毒→初代培養→增殖培養→壯苗培養→生根培養→成品苗。但是現有技術存在有如下缺點：因為莖段繁殖需經歷脫分化和分化過程，而該過程最易發生變異；同時，由于轉接的次數之多、生長慢，成苗時間長，導致變異率高，很難保證種苗完全保留野生金線蓮的優良品質。另外，由于上述工藝分步培養法工藝復雜，不但成苗時間長，而且容易引起組培苗污染，并導致組培苗污染率提高。

發明內容

本發明的目的就是克服先有的技術不足而提供全新的一種高效快速繁殖金線蓮組培苗的方法。具體是：采用金線蓮種子通過培養使其萌發形成原球莖并進一步形成小芽，然后通過繼代培養變成具有1～2片真葉并帶有1～2條幼根的小苗，最后將小苗進行一步成苗培養，使小苗長成具有3～4條根、3～4片葉、株高≥2.5cm、莖粗≥0.2cm的商品組培苗；本發明在實施過程中，還將種子培養基、繼代培養基、一步成苗培養基進行科學合理的改良、配制。本發明實現了金線蓮在組培過程中縮短其生長周期、降低了污染率、還減少了轉接次數，并最終達到快速繁殖金線蓮的目的。

本發明是通過以下技術方案來實現的：

1、一種高效快速繁殖金線蓮組培苗的方法，技術方案中包括以下步驟：

(1)將金線蓮蒴果頂部用刀片切割一小部分，用清水清洗一遍表面，放置于組培瓶中，然后在無菌操作臺中先用酒精浸泡30s，接著用氯化汞水溶液浸泡8min，最后用無菌水反復漂洗3～5次后即可完成消毒步驟；

(2)將步驟(1)中得到金線蓮種子放置于無菌的鋁片上，用手術刀切開后播種于種子培養基中，在25±3℃、濕度≤60％、光照強度1000Lux-1500Lux、光照時間為10h/d的培養室中培養，培養1個月后種子萌發形成原球莖并進一步形成小芽；其中，上述的種子培養基組成為：+6-卡基嘌呤2.5mg/L～3mg/L+萘乙酸0.5mg/L～1mg/L+白糖30g/L+土豆200g/L+瓊脂5.1g/L；

(3)將步驟(2)得到的金線蓮小芽轉接于繼代培養基中，在25±3℃、濕度≤60％、光照強度3000Lux-3500Lux、光照時間為11h/d的培養室中培養，1個月后小芽變成具有1～2片真葉并帶有1～2條幼根的小苗；其中，上述中繼代培養基組成為：MS+6-卡基嘌呤3.5mg/L～4mg/L+萘乙酸0.5mg/L～1mg/L+白糖30g/L+土豆200/L+瓊脂5.1g/L；

(4)將步驟(3)中得到的小苗轉移到一步成苗培養基中，在25±3℃、濕度≤60％、光照強度3000Lux-3500Lux、光照時間為12h/d的培養室中培養，1個月后小苗長成具有3～4條根、3～4片葉、株高≥2.5cm、莖粗≥0.2cm的商品組培苗；其中，上述中一步成苗培養基組成為：+6-卡基嘌呤0.5mg/L～1mg/L+萘乙酸2.5mg/L～3mg/L+白糖20g/L+土豆200g/L+瓊脂5.1g/L。

2、所述的一種高效快速繁殖金線蓮組培苗的方法，技術方案中的酒精體積濃度為75％。

3、所述的一種高效快速繁殖金線蓮組培苗的方法，技術方案中的氯化鈣水溶液濃度為0.1％。

本發明既有如下優點：

1、本發明所提出的種子培養基、繼代培養基、一步成苗培養基的制備方法科學合理。

2、通過實施本發明，不但克服了現有金線蓮組培利用莖段繁殖時工藝流程復雜、生長周期長、變異率高等缺陷，而且還實現了一步成苗，具有生長周期短、變異率低、工藝簡易的效果。