[發(fā)明專(zhuān)利]牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎二聯(lián)滅活疫苗及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310184764.6
• 申請(qǐng)日: 2013-05-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104162154B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-02-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 武華;王煒;師新川;吳永旺
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 華威特（江蘇）生物制藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61K39/295
• 分類(lèi)號(hào): A61K39/295;A61P31/14;A61P31/22
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司11139
• 代理人: 孫皓晨,韓小雷

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于獸用生物制品技術(shù)領(lǐng)域，更具體是涉及一種預(yù)防牛傳染性鼻氣管炎和牛病毒性腹瀉的二聯(lián)滅活疫苗及其制備方法和應(yīng)用。

技術(shù)背景

牛病毒性腹瀉(Bovine?viral?diarrhea，BVD)是由牛病毒性腹瀉病毒(Bovine?viral?diarrhea?virus，BVDV)引起的以發(fā)熱、黏膜糜爛潰瘍、白細(xì)胞減少、腹瀉、咳嗽及懷孕母牛流產(chǎn)或產(chǎn)出畸形胎兒為主要特征的一種傳染病。牛病毒性腹瀉病毒(Bovine?viral?diarrhea?virus，BVDV)屬于黃病毒科（Flaviviridae），瘟病毒屬（Pestivirus）。基因組為單股正鏈RNA，由一個(gè)開(kāi)放閱讀框（ORF）和5’UTR及3’UTR組成。1946年Olafson等首次發(fā)現(xiàn)并分離出BVDV。目前，該病在世界上廣泛存在。李佑民等于1983年首次從流產(chǎn)胎兒的脾臟中分離到了BVDV，證明該病已在我國(guó)存在。近年來(lái)從我國(guó)多個(gè)發(fā)病牛場(chǎng)分離到了BVDV，給我國(guó)養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。對(duì)我國(guó)部分省份的牛血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，該病在我國(guó)呈上升態(tài)勢(shì)。

牛傳染性鼻氣管炎（Infectious?bovine?rhinotracheitis，IBR）是由牛皰疹病毒1型病毒（BHV-1）引起的牛的一種急性、熱性、接觸性傳染病，臨床表現(xiàn)為上呼吸道及氣管黏膜發(fā)炎、呼吸困難、流涕等癥狀，還可引起膿皰性外陰道炎、龜頭炎、結(jié)膜炎、幼牛腦膜炎、乳房炎、流產(chǎn)等。該病于二十世紀(jì)50年代初最早見(jiàn)于美國(guó)，目前世界范圍內(nèi)流行。我國(guó)于1980年首次從新西蘭進(jìn)口種牛中發(fā)現(xiàn)此病，目前在大部分省份的奶牛、黃牛和水牛均有IBRV感染，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失，疫苗是防控該病的主要措施之一。

商品化的BVD疫苗和IBR疫苗主要為弱毒活疫苗和滅活疫苗，二者各有其優(yōu)點(diǎn)。弱毒活疫苗能誘導(dǎo)免疫反應(yīng)快速、免疫期持久和可誘導(dǎo)局部粘膜免疫。滅活疫苗的最大優(yōu)勢(shì)在于其安全性，不存在排毒、無(wú)流產(chǎn)和持續(xù)性感染的風(fēng)險(xiǎn)，在某些情況下可代替弱毒疫苗進(jìn)行使用，尤其是針對(duì)懷孕牛群和經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的奶牛群。對(duì)于這兩種傳染病，目前我國(guó)尚沒(méi)有商品化疫苗投放市場(chǎng)，養(yǎng)牛業(yè)面臨巨大的威脅，發(fā)生疫情無(wú)計(jì)可施，在臨床病例研究中發(fā)現(xiàn)，BVDV和IBRV往往混合感染。因此急需研制一種能夠同時(shí)預(yù)防上述疫病的有效疫苗。本發(fā)明提供了一種能同時(shí)預(yù)防牛傳染性鼻氣管炎和牛病毒性腹瀉的二聯(lián)滅活疫苗，通過(guò)該制品進(jìn)行免疫接種，可有效保障牛免受BVDV和IBRV的感染，又可“一針兩防”，省時(shí)、省力、節(jié)約成本。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一是提供一種免疫力高、無(wú)免疫干擾的牛病毒性腹瀉及牛傳染性鼻氣管炎的二聯(lián)滅活疫苗組合物，達(dá)到同時(shí)預(yù)防BVD和IBR的目的。

本發(fā)明的目的之二是提供所述的牛病毒性腹瀉和牛傳染性鼻氣管炎的二聯(lián)滅活疫苗在在制備預(yù)防或治療牛傳染性鼻氣管炎及牛病毒性腹瀉藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的之三是提供一種制備牛病毒性腹瀉和牛傳染性鼻氣管炎的二聯(lián)滅活疫苗組合物的方法。

本發(fā)明是一種牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎二聯(lián)滅活疫苗，其特征在于有效成分包括牛病毒性腹瀉Ⅰ型病毒滅活抗原以及牛傳染性鼻氣管炎病毒滅活抗原。

在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的牛病毒性腹瀉Ⅰ型病毒滅活抗原為滅活的牛病毒性腹瀉病毒NM01株，所述的牛傳染性鼻氣管炎病毒滅活抗原為滅活的牛傳染性鼻氣管炎病毒LN01/08株，所述牛病毒性腹瀉Ⅰ型病毒NM01株，命名為BVDV?NM01株，分類(lèi)命名為牛病毒性腹瀉病毒，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址在北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院中科院微生物研究所，其菌種保藏編號(hào)為：CGMCC?No.6032，保藏日期為2012年4月20日；所述牛傳染性鼻氣管炎病毒LN01/08株，命名為IBRV?LN01/08株，分類(lèi)命名為牛傳染性鼻氣管炎病毒，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址在北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院中科院微生物研究所，其菌種保藏編號(hào)為：CGMCC?No.6033，保藏日期為2012年4月20日。

本發(fā)明所用毒種IBRV?LN01/08株是從發(fā)病牛鼻拭子經(jīng)MDBK細(xì)胞連續(xù)傳代并經(jīng)克隆純化分離所得，病毒毒價(jià)可達(dá)10^8.0TCID₅₀/ml以上。

進(jìn)一步的，本發(fā)明還提供了所述的二聯(lián)滅活疫苗在制備預(yù)防或治療牛傳染性鼻氣管炎及牛病毒性腹瀉中的應(yīng)用。