[發明專利]豬繁殖與呼吸綜合癥和豬乙型腦炎雙重一步法RT-PCR診斷試劑盒有效
| 申請號: | 201310181721.2 | 申請日: | 2013-05-17 |
| 公開(公告)號: | CN103215389A | 公開(公告)日: | 2013-07-24 |
| 發明(設計)人: | 余波;冉懋韜;譚詩文;史開志 | 申請(專利權)人: | 貴州省畜牧獸醫研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司: | 貴陽中新專利商標事務所 52100 | 代理人: | 李亮;程新敏 |
| 地址: | 550005*** | 國省代碼: | 貴州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 繁殖 呼吸 綜合癥 豬乙型 腦炎 雙重 一步法 rt pcr 診斷 試劑盒 | ||
1.一種豬繁殖與呼吸綜合癥和豬乙型腦炎雙重一步法RT-PCR診斷試劑盒,其特征在于:包括100μL?DL2000、20μL?RT-PCR一步法酶、250μL?酶緩沖液、300μLRNase?Free?dH2O、80μL混合引物,各引物的濃度均為10μmol/L、20?μL陽性對照及?20μL陰性對照;混合引物包括PRRSV?上游引物、PRRSV?下游引物、JEV上游引物及JEV下游引物;PRRSV?上游引物的序列為:5’?–CGCCCAACAAAACCAGTCCAGA–3’,PRRSV?下游引物的序列為:5’–CAGTATATTGCTCGGCAAACT–3’;JEV上游引物的序列為:5’?–TCCTCGTCATAGGGATTTGCT–3’,JEV下游引物的序列為:5’?–AGGCCCAAGGCGTGAGGGCGG–3’。
2.根據權利要求1所述的豬繁殖與呼吸綜合癥和豬乙型腦炎雙重一步法RT-PCR診斷試劑盒,其特征在于:陰性對照為超純水。
3.根據權利要求1所述的豬繁殖與呼吸綜合癥和豬乙型腦炎雙重一步法RT-PCR診斷試劑盒,其特征在于:陽性對照為標準豬繁殖與呼吸綜合癥和豬乙型腦炎RNA?RT-PCR產物。
4.根據權利要求1所述的豬繁殖與呼吸綜合癥和豬乙型腦炎雙重一步法RT-PCR診斷試劑盒,其特征在于:所述的RT-PCR一步法酶由50%的甘油、3?mmol/μL的MgCl2,25mmol/μL的Tris-HCl及0.5μL?反轉錄酶組成。
5.根據權利要求1所述的豬繁殖與呼吸綜合癥和豬乙型腦炎雙重一步法RT-PCR診斷試劑盒,其特征在于:所述的酶緩沖液由3?mmol/μL的MgCl2,500pmol/μL的?dNTP?2.0μL,25mmol/μL的Tris-HCl組成。
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