[發明專利]一種干擾Survivin基因表達的siRNA分子及其應用

在審

• 申請號: 201310180793.5
• 申請日: 2013-05-16
• 公開（公告）號: CN104164434A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 王天有;余波;唐鎖勤;周晨光;李劍光
• 申請（專利權）人: 首都兒科研究所;杭州普施康生物科技有限公司;中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;C12N15/87;C12N5/10;A61K48/00;A61P35/00
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1.一種雙鏈siRNA分子，其特征是由下述核苷酸序列的正義鏈和反義鏈組成：

正義鏈5′-CGUCAUCUGGCUCCCAGCC?UUCCX-3′，

反義鏈5′-GGAAGGCUGGGAGCCAGAU?GACGX-3′，其中X代表tt、TT或UU，t代表脫氧胸腺嘧啶。

2.一種siRNA表達質粒，其特征在于，所述質粒包含權利要求1所述的雙鏈siRNA分子的脫氧核糖核酸序列。

3.一種Survivin基因沉默試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含權利要求權利要求1所述的雙鏈siRNA分子，或者包含權利要求2所述的siRNA表達質粒。

4.一種沉默細胞Survivin基因表達的方法，包括以下步驟：

1)將細胞按1×10⁴/孔接種到24孔細胞培養板中，在37℃、5％CO₂培養箱細胞培養24小時。

2)用Opti-MEM分別稀釋權利要求1所述的siRNA分子和LipofectamineRNAiMAX，將兩者混合，室溫下孵育10-20分鐘。

3)將第2)步所得的混合物加入第1)步培養細胞中，在37℃孵育24-48小時。

5.權利要求1所述的siRNA分子在制備抗腫瘤藥物中的應用。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，所述腫瘤為肝癌、肺癌、宮頸癌、膀胱癌、白血病、皮膚鱗癌、胃癌、結腸癌、多發性骨髓瘤、骨肉瘤、黑色素瘤中的至少一種。