[發明專利]過氧化物還原酶IV的循環免疫復合物及其應用

有效

• 申請號: 201310179764.7
• 申請日: 2013-05-15
• 公開（公告）號: CN103308674B
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 張大;文李玲
• 申請（專利權）人: 周繼蓉;重慶聯佰博超醫療器械有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/573;G01N33/577
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所11308
• 代理人: 蘭渝宏

技術領域

本發明涉及醫學領域，特別涉及免疫復合物及其應用。

背景技術

抗原-抗體復合物（antigen-antibody complex），根據全國科學技術名詞審定委員會的定義，是指抗體與抗原借助靜電力、氫鍵、范德華力等次級鍵可逆性結合而形成的多分子復合物。能激活補體、參與免疫調節、介導III型超敏反應。免疫復合物（immune complex;IC），是抗原-抗體復合物中的一種，根據全國科學技術名詞審定委員會的定義，是指抗體與可溶性抗原結合而形成的復合物。抗體量足以交聯抗原時形成大的免疫復合物，由網狀內皮系統中表達Fc受體和補體受體的細胞所清除；抗原過量時則形成小的可溶性免疫復合物，沉積于小血管而造成小血管損傷。循環免疫復合物(circulating immunocomplex，CIC)是一類在抗原量稍過剩時，形成中等大小的可溶性免疫復合物(8.8～19S)，它既不能被吞噬細胞清除，又不能通過腎小球濾孔排出、可較長時間游離于血液和其他體液中，當血管壁通透性增加時，此類IC可隨血流沉積在某些部位的毛細血管壁或嵌合在腎小球基底膜上，激活補體導致ICD（免疫復合物沉積）的發生。檢查組織內或循環IC的存在有助于某些疾病的診斷、發病機制的研究、預后估計、病情活動觀察和療效判斷等。并不是所有的抗原-抗體復合物都具備循環免疫復合物的特性。尋找和疾病相關性強的循環免疫復合物對疾病的診斷意義重大。

過氧化物還原酶(Peroxiredoxins Prx)是生物體內普遍存在的一個重要的具有抗氧化活性和調節信號轉導的抗氧化蛋白,它對生物體具有保護作用。過氧化物還原酶Ⅳ是過氧化物還原酶家族中的一員，文獻對過氧化物還原酶Ⅳ報道較少。申請號為201110025631.5的中國發明專利申請，介紹了過氧化物還原酶Ⅳ在制備類風濕關節炎早期診斷試劑中的應用，該專利申請指出了過氧化物還原酶Ⅳ作為類風濕關節炎的特異性抗原，并未證實類風濕關節炎當中存在過氧化物還原酶Ⅳ循環免疫復合物存在；公開號為WO2010146064A1，申請號為 PCT/EP2010/058414的專利申請，介紹了一種夾心ELISA試劑盒，其檢測的對象為過氧化物還原酶Ⅳ，具體方法為：將過氧化物還原酶Ⅳ的特異性抗體作為捕獲分子包被于固相中，最為第一抗體，與催化活性分子標記的第二抗體。用于檢測待測樣品中過氧化物還原酶Ⅳ的含量。并指出，該含量和類風濕關節炎、 cardiac diseases(心臟病),sepsis（膿毒癥）,pancreatitis（胰腺炎）,other gi tract deseases(除胰腺炎之外的其他消化疾病),breast CA（卵巢囊腫）,colon ca（結腸癌）,pancreas ca（胰腺癌）,diabetes（糖尿?。琸idney disease（腎?。?neurodegenerative disorders(神經退化性紊亂)有關。但是，該專利文獻，僅揭示了過氧化物還原酶Ⅳ的表達量和上述疾病有關，以及其含量的檢測方法，并未有提到其和免疫相關的任何信息；那么，過氧化物還原酶Ⅳ是否可以在類風濕關節炎患者中形成循環免疫復合物呢？目前尚無相關文獻報道，而且僅有上述專利的結果是不能推導出類風濕關節炎患者血清中存在過氧化物還原酶Ⅳ循環免疫復合物的，因為在類風濕關節炎已知的數十種自身抗原(Wolfgang Hueber,Brian A.Kidd,Beren H.Tomooka,Byung J.Lee,Bonnie Bruce, James F.Fries,Grete Paul Monach,Jan W.Drijfhout,Walther J.van Venrooij,Paul J.Utz,Mark C.Genovese,William H.Robinson.Antigen Microarray Profiling of Autoantibodies in Rheumatoid Arthritis.ARTHRITIS&RHEUMATISM Vol.52,No.9,September2005,pp2645–2655)當中，也只有少部分與其特異性抗體結合形成了循環免疫復合物。目前在類風濕關節炎已知抗原當中，只有類風濕因子（rheumatoid factor，RF）（Newkirk MM,Fournier MJ,Shiroky J:Rheumatoid factor avidity in patients with rheumatoid arthritis:identification of pathogenic RFs which correlate with disease parameters and with the gal glycoform of IgG.J Clin Immunol1995,15:250-257.）、II型膠原(collagen type II)（Steffen C,Ludwig H, Knapp W,Thumb N,Eberl R,Frank O,Freilinger H:Collagen antibodies and collagen-anticollagen immune complexes in rheumatoid arthritis.Z Rheumatol 1975,34:391-399.）、葡萄糖-6-磷酸異構酶（glucose-6-phosphate isomerase，GPI) (Korganow AS,Ji H,Mangialaio S,Duchatelle V,Pelanda R,Martin T,Degott C, Kikutani H,Rajewsky K,Pasquali JL,Benoist C,Mathis D:From systemic T cell self-reactivity to organ-specific autoimmune disease via immunoglobulins.Immunity 1999,10:451-461)及瓜氨酸化修飾后的纖維蛋白原等（citrullinated fibrinogen）（Xiaoyan Zhao,Nwora Lance Okeke,Orr Sharpe,Franak M Batliwalla,Annette T Lee,Peggy P Ho,Beren H Tomooka,Peter K Gregersen and William H Robinson. Circulating immune complexes contain citrullinated fibrinogen in rheumatoid arthritis.Arthritis Research&Therapy2008,10:R94）在類風濕關節炎中有其循環免疫復合物存在。因而，我們認為，即便已知某一自身抗原，不經過充分的驗證不能判斷其是否能以免疫復合物的形式存在，而且從上述目前類風濕關節炎已知抗原及免疫復合物統計結果看，從某特定抗原驗證出不存在免疫復合物的可能性遠遠大于存在免疫復合物的幾率。